原因不明复发性流产患者外周血共刺激分子

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【关键词】 流产;共刺激分子

【摘要】 目的 探讨原因不明复发性流产患者外周血单核细胞共刺激分子b71、b72的表达水平及作用。方法 流式法检测30例原因不明复发性流产女性(流产组)、25例正常妊娠女性(正常妊娠组)和20例正常未孕女性(正常未孕组)的外周血单核细胞共刺激分子b71、b72的表达水平。结果 流产组女性b71的表达水平显著高于其余2组(p<0.01);流产组女性b72的表达水平显著低于其余2组(p<0.01)。结论 外周血共刺激分子b71、b72的表达异常，可能是原因不明复发性流产发生的重要原因。

【关键词】 流产;共刺激分子

辅助性t淋巴细胞1/辅助性t淋巴细胞2(th1/th2)比值偏移异常与原因不明复发性流产(unexplained recurrent spontaneous abortion，ursa)有密切关系[1]。共刺激分子b71、b72在调控辅助性t淋巴细胞(th)分化在移植免疫耐受方面发挥了重要作用[2]。本文运用流式细胞技术，测定外周血单核细胞表面共刺激分子b71、b72的表达水平，探讨二者在原因不明复发性流产发病中的作用。

　　1 资料与方法

　　1.1 一般资料 流产组：选取2009年4至10月就诊的原因不明复发性流产的患者30例，年龄22～45岁，平均年龄31.4岁;自然流产次数≥3次。正常妊娠组：选取我院同期妊娠12周以内人工流产的的孕妇25例，年龄21～36岁，平均年龄29.1岁;既往无自然流产、死胎、死产史，本次妊娠无阴道流血、腹痛等先兆流产症状和体征，b型超声(b超)证实胚胎发育正常。正常未孕组：选取同期我院健康体检的正常未孕女性20例，年龄26～38岁，平均年龄29.3岁;既往均有妊娠史，但无自然流产、死胎或死产史。以上3组女性均排除染色体、解剖结构、内分泌等方面的异常及生殖道感染、自身免疫性疾病史。

　　1.2 仪器与试剂 epicsxlii型流式细胞仪，鼠抗人fitcb71、peb72、fictγ干扰素、pe白介素4、fitcigg及peigg阴性对照均购自美国becton dickinson公司。

　　1.3 方法

　　1.3.1 血标本采集及单核细胞分离：分别抽取3组(流产组与正常妊娠组均在流产术前抽取)前臂肘静脉血1.5 ml，肝素抗凝，其中1 ml分离外周血单核细胞， 12 h内送流式检验b71和b72。

　　1.3.2 b71和b72细胞百分比的检测：取单细胞悬液1×106/ml，分别加入鼠抗人fitcb71、peb72单克隆抗体及fitcigg及peigg各0.1 ml， pbs洗涤、离心，设本底对照和阴性对照。采用流式细胞仪计数10 000个单核细胞中b71和b72阳性细胞百分比。

　　1.4 统计学分析 应用spss 12.0统计软件，计量资料以±s表示，多组间均数比较采用f检验，两两比较采用q检验，p<0.05为差异有统计学意义。

　　2 结果

　　流产组b71的表达率明显高于其余2组(p<0.01);流产组tb72的表达率明显低于其余2组(p<0.01)。见表1。表1 3组外周血b71、b72表达率比较

　　3 讨论

　　研究表明，正常妊娠是一种“th2现象”，即趋向于th2参与的体液免疫，而偏离th1参与的细胞免疫。rezaei等[3]研究表明，正常妊娠时th2水平升高，母体内th2介导的的免疫耐受占据了主导地位，正常妊娠母体对胎儿抗原表现为保护性免疫为主，排斥反应减弱。阎华等[4]报道表明，在原因不明复发性流产患者体内th1介导的的免疫损伤占主导地位，母体对胎儿抗原表现为免疫排斥，导致了病理妊娠的发生。

　　免疫学研究证实，人体内的th0细胞在抗原递呈细胞共刺激分子b71、b72的刺激下可分别向th1、th2转化[5]。b71主要刺激th0细胞向th1分化，而b72主要协同刺激th0细胞向th2分化[6-8]。本研究发现，流产组女性外周血b71的表达显著高于正常妊娠女性及未孕女性，说明原因不明复发性流产外周血单核细胞共刺激分子b71的表达显著升高，导致了b71刺激th0细胞向th1分化;流产组女性b72的表达低于正常妊娠女性及未孕女性，说明原因不明复发性流产外周血b72表达下降使th0细胞向th2分化减少。上述变化有可能引起了th1/th2比例失衡，使母体内th2占优的免疫保护转向了以th1占优的免疫损伤，使机体对胎儿产生免疫排斥，形成了妊娠免疫损伤的th1现象，导致了原因不明复发性流产的发生。

　　本研究发现，原因不明复发性流产患者外周血中单核细胞b71表达显著升高、b72表达显著降低，反映了原因不明复发性流产的病情变化，由于b71、b72表达水平的异常，影响了原因不明复发性流产患者体内t辅助淋巴细胞的分化，使原因不明复发性流产患者体内th0细胞向th1细胞分化，形成了对妊娠的免疫损伤的th1现象，导致了原因不明复发性流产的发生。当然，原因不明的复发性流产是一复杂的病理过程，影响因素很多，b71、b72表达水平的异常也可能是众多原因和机制中的一环，有待于更进一步的研究。

【参考文献】
　　1 邱丽华,林其德,洪燕,等.原因不明习惯性流产患者主动免疫前后t辅助细胞1、2型细胞因子变化的研究.中华妇产科杂志,2001,36:408410.

　　2 mcadam aj,schweitzer an,sharp role of b7 costimulation in activation and differentiation of cd+4 and cd+8 t l rew,1998,165:231247.

　　3 rezaei a.thelper 1 cytokines increase during early pregnancy in women with a history of recurrent spontaneous sci m,2002,8:607.

　　4 阎华,王爱华,王华芝,等.肿瘤坏死因子α、白细胞介素10在反复自然流产患者母胎界面及外周血淋巴细胞的表达.生殖医学杂志,2003,12:232.

　　5 周光炎主编.免疫学原理.第1版.上海:上海科学技术文献出版社,2000.154155.

　　6 yoshinaga sk,zhang m,pistillo j,et terization of a new human b7related protein:b7rp1 is the ligand to the costimulatoryprotein immunol,2000,12:14391447.

　　7 刘影，张素娥，方方，等.原因不明复发性流产患者外周血th1/th2与共刺激为子bt1、b72的关系.河北医药，2008，30：584.

　　8 张永凤，徐岚，杨美如，等.习惯性流产与细胞免疫的关系.中国基层医药，2008，15：1807.

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