摘 要：目的：建立高效液相色潽法测定天麻药材中天麻苷及天麻苷元含量的方法。方法：选用美国热电Thermo Scientific Hypersil BDS色谱柱 (4.6mm×250mm×5μm)，以乙腈-0.05%磷酸溶液(3∶97)为流动相，检测波长为220 nm，流速1.0ml／min。结果：该色谱条件下天麻苷与天麻苷元可有效分离。天麻苷及天麻苷元均呈良好的线性、重复性和准确度良好。结论：采用高效液相色潽法测定天麻药材中天麻苷及天麻苷元含量结果准确、可靠，可以将此方法用于天麻药材的质量控制
关键词：天麻药材 天麻苷 天麻苷元 含量测定
，
（1，，,江苏，徐州，221600；2，， 江苏，徐州，221006）
1.仪器及方法
1.1仪器及试剂
Agilent1260高效液相色谱仪（安捷伦科技有限公司）
CPA225D电子天平（德国赛多利斯）
乙腈、甲醇（色谱纯 迪马公司）
磷酸（色谱纯 天津大茂化学试剂厂）
天麻苷对照品、天麻苷元对照品（中国食品药品生物检定研究院）
1.2色谱条件 [3]
选用美国热电Thermo Scientific Hypersil BDS色谱柱(4.6mm×250mm×5μm)，以乙腈-0.05%磷酸溶液(3∶97)为流动相，检测波长为220 nm，流速1.0ml／min，进样量为10μl，柱温为室温。理论塔板数、拖尾因子、分离度均应符合要求。
1.3对照品贮备液的制备
天麻苷及天麻苷元对照品使用前需置于减压干燥器内常温干燥12小时以上方可使用。精密称取天麻苷对照品25.12mg，置25ml量瓶中，加流动相溶解并稀释至刻度，摇匀，制成1ml含天麻苷1.0048mg的溶液作为对照品贮备液（1）。精密称取天麻苷元9.96mg，置100ml量瓶中，加流动相溶解并稀释至刻度，摇匀，制成1ml含天麻苷元99.6μg的溶液作为对照品贮备液（2）。
1.4供试品溶液的制备：取天麻药材适量，粉碎过三号筛，精密称取天麻药材细粉约2g，置圆底烧瓶中,精密加入70%的甲醇溶液50 ml，称定重量,水浴加热回流4 h，放冷至室温后再次称定重量，用70%的甲醇溶液补足减失的重量，滤过，精密量取续滤液5 ml，置蒸发皿中浓缩至近干，残渣加流动相溶解并转移至10 ml量瓶中，加流动相稀释至刻度，摇匀。经0.45μm的微孔滤膜过滤，作为供试品溶液。
2.结果
2.1色谱峰的定位与分离度试验
精密量取对照品贮备液（1）1 ml，置10ml量瓶中，加流动相稀释至刻度制成对照品溶液（1）；精密量取对照品贮备液（2）1 ml，置10ml量瓶中，加流动相稀释至刻度制成对照品溶液（2）；分别精密量取对照品贮备液（1）1 ml和对照品贮备液（2）1ml置同一10ml量瓶中加流动相稀释至刻度制成对照品溶液（3）。分别取上述3种溶液各10μl注入高效液相色谱仪，记录色谱图。结果显示：对照品的流出顺序为天麻苷（tR=7.861）、天麻苷元（tR=12.264）。两峰的分离度为7.81。结果表明在该色谱条件下天麻苷与天麻苷元可有效分离。
2.2线性试验
分别精密量取对照品贮备液（1）和对照品贮备液（2）各10ml，混匀，分别精密量取混合液0.2ml、0.5ml、1.0ml、2.0ml、5.0ml置10ml量瓶中，加流动相稀释至刻度，摇匀，分别精密量取10μl，注入高效液相色谱仪，记录峰面积，以溶液浓度为横坐标，峰面积为纵坐标，建立平面直角坐标系、计算回归方程和r值。天麻苷的线性回归方程为y=77.026x-0.8247，r=1.0000；天麻苷元的线性回归方程为y=159.06x-9.3161，r=0.9998。结果表明在该色谱条件下，天麻苷及天麻苷元均呈良好的线性。
2.3重复性试验
天麻药材细粉，精密称取6份，每份约2g，分别按供试品溶液制备方法，制得6份供试品溶液，分别量取10μl，注入高效液相色谱仪，记录峰面积，根据回归方程计算样品中天麻苷和天麻苷元的含量。结果表明：该方法测定天麻药材中天麻苷和天麻苷元的含量重复性较好。
2.4回收率试验
取天麻药材细粉，精密称取6份，每份约2g按供试品溶液制备方法，制得6份供试品溶液，根据天麻药材中天麻苷和天麻苷元的含量，加入等量的天麻苷和天麻苷元对照品。精密量取10μl，注入高效液相色谱仪，并计算平均回收率。结果天麻苷和天麻苷元的平均回收率分别为99.82%和98.95%。结果表明测试结果的准确度良好。
参考文献
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