首页 > 论文范文 > 医疗卫生

弥漫大B细胞淋巴瘤双重表达(弥漫性大b细胞淋巴瘤免疫组化表达)

2022-11-09  本文已影响 136人 
中国论文网为大家解读本文的相关内容: 【摘要】 目的 探讨bcl2、bcl6、cd10在弥漫性大b细胞淋巴瘤(diffuse large bcell lymphoma,dlbcl)中的表达及意义。 方法 应用免疫组织化学sp法,检测60例弥漫性大b细胞淋巴瘤标本中bcl2、bcl6、cd10蛋白的表达水平。 结果 bcl2、bcl6、cd10在60例弥漫性大b细胞淋巴瘤中的表达率分别为55.0%(33/60)、48.3%(29/60)、46.7%(28/60),其中cd10(+)/bcl6(+) 15例,25%;cd10(+)/bcl6(-)13例,21.7%; cd10(-)/bcl6(+)14例,23.3%;cd10(-)/bcl6(-)18例,30%。cd10(+)/bcl6(+)与cd10(-)/bcl6(-)中 bcl2的表达差异具有统计学意义。结论 bcl2有望成为dlbcl亚分类的指标。

【关键词】 bcl2;bcl6;cd10;弥漫性大b细胞淋巴瘤 ;免疫组织化学

expression of bcl2,bcl6,cd10 protein and their significance in subgroups of diffuse large bcell lymphoma

chen yu1, zhao tong2,cai qingfa3, wu bingxu1,chen meiyan1

ment of pathology, the 95th military hospital, putian 351100,china;ment of pathology,nanfang medical university;3. department of pathology,affiliated hospital of putian universityabstract:objective to investigate the expression of bcl2,bcl6,cd10 protein and their significance in subgroups of diffuse large bcell lymphoma. methods immunohistochemistry technique (sp method) was used to assess the expression levels of bcl2,bcl6,cd10 protein in 60 cases of diffuse large bcell lymphoma. results expression of bcl2,bcl6 and cd10 protein was found in 33/60(55.0%),29/60(48.3%),28/60(46.7%) cases, respectively. the cd10/bcl6 patterns were as follows: cd10(+)/bcl6(+) 15 cases,25%;cd10(+)/bcl6(-)13 cases,21.7%; cd10(-)/bcl6(+)14 cases,23.3%;cd10(-)/bcl6(-)18 cases,30%。ression levels of the bcl2 protein in cd10(+)/bcl6(+) pattern was higher than that in cd10(-)/bcl6(-)pattern (p=0.037).conclusion the bcl2 protein may be of value to distinct subgroups of diffuse large bcell lymphoma.

key words:bcl2;bcl6;cd10;diffuse large bcell lymphoma;immunohistochemistry

弥漫性大b细胞淋巴瘤(diffuse large bcell lymphoma,dlbcl)是成人最常见的、高度恶性的非霍奇金淋巴瘤(nonhodgkin's lymphomas,nhl),约占成人nhl的40%[13],尽管who将其列为一种独立的疾病类型,但它实际上是一类异质性的淋巴瘤,应用传统的chop(环磷酰胺、阿霉素、长春新碱、泼尼松)方案治疗发现仅有一半左右的患者可获得缓解[2],另一半患者要么治疗无效,要么治疗缓解后复发,最后都导致死亡。对于这一部分的患者,寻找有效的指标来指导治疗是非常重要的。近年来国外一些学者[48]研究发现利用生发中心标志物表达的差异可对dlbcl进行亚分类,另一些学者[912]发现细胞凋亡调控基因在dlbcl分类中也具有重要作用。我们应用免疫组织化学方法检测cd10、bcl6、bcl2在dlbcl中的表达,并对其表达情况及临床意义进行探讨。

1 材料与方法

1.1 材料

收集本院、莆田学院附属第一医院病理科2003年1月~2006年12月诊断明确病例资料齐全的dlbcl 60例,所有病例均为中性福尔马林固定,常规石蜡切片,he染色。由两位以上从事淋巴瘤研究的专家重新阅读,按照2001年who关于淋巴造血系统肿瘤分类标准重新分类。

1.2 方法

采用石蜡切片链霉素抗生物素蛋白过氧化物酶连接法(sp)免疫组织化学染色,进行生发中心标志物(cd10、bcl6)、凋亡抑制基因bcl2的检测,所用抗体来源、克隆号、工作浓度见表1。免疫组化试剂盒购自福州迈新生物技术有限公司。抗原修复液为ph9.0的乙二胺四乙酸(edta),cd20用0.01mol/l的枸橼酸缓冲液(ph6.0)。用pbs代替一抗作阴性对照,以扁桃体组织作阳性对照。dab显色,苏木素衬染。cd10/bcl6作为生发中心样分类的依据。

1.3 结果判定

阳性结果判断标准: cd20、cd10 阳性定位于细胞膜, bcl6阳性定位于细胞核,bcl2阳性主要位于细胞质,以>20%的肿瘤细胞染色判为阳性。

1.4 统计学方法

采用spss10.0统计分析软件进行χ2检验,p<0.05有差异有统计学意义。

表1 抗体名称、来源及工作浓度

tab 1 immunohistochemical study:

antibodies and conditions of use

antibodyclonesoursedilutioncd20l26maxim1∶20bcl2100/d5maxim1∶1bcl6p1f6neomarker1∶1cd1056c6zymed1∶1

2 结果

2.1 临床及病理结果

60例dlbcl患者,年龄16~91岁,平均年龄52.9岁。男29例,女31例,男女比例为0.94∶1。累及淋巴结27例(45.0%),单纯累及结外33例(55.0%),主要见于胃肠道、中枢神经系统、颌下腺、睾丸等。参照2001年who关于淋巴造血系统肿瘤分类标准,组织学变型主要是中心母细胞性,占86.7%,见表2。表2 60例dlbcl组织学变型

2.2 蛋白的表达

60例dlbcl中,cd20全部阳性, cd10阳性率46.7% (28/60), bcl6阳性率48.3% (29/60),bcl2阳性率55.0% (33/60)。bcl6/cd10模式为:cd10(+)/bcl6(+) 15例,25%;cd10(+)/bcl6(-)13例,21.7%; cd10(-)/bcl6(+)14例,23.3%;cd10(-)/bcl6(-)18例,30%。

2.3 cd10/bcl6与bcl2表达的相关性

cd10(+)/bcl6(+)15例中,bcl2(+)3例,阳性率20.0%;cd10(-)/bcl6(-)18例中,bcl2(+)10例,阳性率55.6%。两者的表达差异具有统计学意义(χ2=4.332,p<0.05)。cd10(+)28例中,10例表达bcl2,阳性率57.1%;cd10(-)32例中,17例表达bcl2,阳性率53.1%; 两者bcl2表达差异无统计学意义(χ2=0.097,p>0.05)。bcl6(+)27例中,9例表达bcl2,阳性率33.3%; bcl6(-)33例中,25例表达bcl2,阳性率75.8%;两者bcl2的表达差异有统计学意义(χ2=10.884,p<0.05)。

3 讨论

dlbcl是高度侵袭性、异质性的淋巴瘤,在临床表现、形态学特点、免疫表型和遗传学特征等方面都存在明显差异,但若早期诊断、强力化疗,近半数的患者可获得缓解。以往人们常用国际预后指数(ipi)数值的大小判断预后,但临床应用证明大多数dlbcl的ipi数值为中间值[13,14],难以判断预后。2000年以来国外采用cdna微阵列技术[47] 研究发现在基因水平上可以将dlbcl分为三种类型:(1)生发中心样(germinal center bcelllike ,gcb):基因表达特征与正常生发中心b细胞相似;(2)活化b细胞样(activated bcelllike,abc):基因表达特征与活化的外周血b细胞相似;(3)第3型(type 3)。并且发现gcb的预后明显好于abc和type 3,故将dlbcl简单分为两型:gcb与nongcb ,前者代表预后较好的一型,后者则代表预后较差的一型。但cdna微阵列技术要求新鲜或冰冻标本以提取足够的rna, 所使用芯片的价格比较昂贵,临床上难以推广应用。近年来人们把研究的方向转向蛋白水平的表达上,并发现表达cd10、bcl6的患者预后较好。

cd10,急性淋巴母细胞性白血病共同抗原,为膜相关的中性肽链内切酶;在淋巴细胞的分化过程中,它表达于前b细胞和生发中心b细胞,大约75%的前b淋巴母细胞性白血病及大部分滤泡性淋巴瘤均表达cd10,在基因分析中发现cd10的表达与t(14∶18) 染色体异位有关,因此可以作为生发中心细胞的标志物[15]。本组cd10的阳性率为46.7%(28/60),高于国外的报道[11,16],可能与本组病例大部分为中心母细胞性有关。

bcl6,锌指蛋白,为一核内转录因子,属于可调节细胞的增殖、分化及器官的发育、形成的锌指蛋白家族。bcl6基因首先在伴有染色体2q27转位的dlbcl中发现,在成熟b细胞的生发中心内表达,但却未见于不成熟的前体细胞或分化好的浆细胞,它在b细胞的分化和生发中心形成中起重要作用。bcl6基因具有控制炎细胞浸润、淋巴因子表达及生发中心形成的生理作用,可作为一转录因子抑制生发中心b淋巴细胞进一步分化成熟而导致nhl的发生[17],也可作为生发中心细胞的标志物。研究表明cd10和bcl6联合应用能够确定dlbcl的gcb型,是预后好的有效指标[46,15]。本组bcl6阳性率为48.3%(29/60),与文献报道相近。60例dlbcl中,cd10(+)/bcl6(+) 15例(25%),低于bai m(32%)的报道[18]。cd10(-)/bcl6(-)18例(30%),与bai m(31%)的报道相近[18]。但cd10(+)/bcl6(-)或cd10(-)/bcl6(+)的病例占38%,对于这一部分的患者,其预后的判断指标仍需进一步探讨。

大量研究表明细胞凋亡受众多基因调控,bcl2基因是细胞凋亡的重要调节基因,它首先在人体内的b淋巴细胞中发现,是一原癌基因,能抑制细胞凋亡。它们在线粒体参与的凋亡途径中起调控作用,能控制线粒体中细胞色素c等凋亡因子的释放。文献[8,13,19]报道bcl2高表达在dlbcl中较为常见(30%~60%),其中20%~30%病例因bcl2基因易位,即t(14;18)导致bcl2高表达,其余病例因bcl2基因扩增而使bcl2过表达。在dlbcl中,bcl2高表达的患者预后明显差[4,14,20],并与化疗耐药有关[19]。本组bcl2阳性率为55.7%(33/60),与国外大部分研究结果相近[8,13]。其中cd10(+)/bcl6(+)15例中,bcl2阳性率为20%,bcl6(-)/cd10(-)18例中,bcl2阳性率为55.6%,两者表达差异具有统计学意义,说明表达生发中心标志物的病例bcl2低表达,而生发中心标志物不表达的病例bcl2高表达,提示bcl6/cd10与bcl2联合应用可能成为dlbcl亚分类的指标。

本组cd10(+)与cd10(-)的病例,bcl-2表达的差异无统计学意义,但bcl6(+)与 bcl6(-)的病例bcl2表达的差异具有统计学意义,是否提示bcl6(-)的病例可根据bcl2的表达判断预后,bcl6与bcl2的表达是否有一定的相关性,有待进一步研究。

【参考文献】
[1]jaffy es, harris nl, stein h, et al. world health organization classification of tumours. pathology and genetics of tumours of haematopoietic and lymphoid tissues[m]. lyons:iarc press,2001.111235.

[2] coiffier b. diffuse large cell lymphoma[j]. curr opin oncol,2001,13(5):325334.

[3] 陈愉,杜洪,胡维维,等.非霍奇金淋巴瘤365例who新分类的临床病理分析[j].诊断病理学杂志,2004,11(5):304307.

[4] alizadeh aa,eisen mb,davis re,et al. distinct types of diffuse large bcell lymphoma identified by gene expression profiling[j]. nature, 2000,403(6769):503511.

[5] rosenwald a,wright g,chan wc,et al. the use of molecular profiling to prodict survival after chemotherapy for diffuse large bcell lymphoma[j]. n engl j med, 2002,346(25):19371947.

[6] ship ma,ross kn,tamayo p,et al. diffuse large bcell lymphoma outcome prediction by geneexpression profiling and supervised machine learning[j]. nat med, 2002,8(1):6874.

[7] wright g ,tan b ,rosenwald a ,et al.a gene expressionbased method to diagnose clinically distinct subgroups of diffuse large b cell lymphoma[j].proc natl acad sci usa, 2003,100(17):99919996.

[8] hans cp, weisenburger dd, greiner tc,et al. confirmation of the molecular classification of diffuse large bcell lymphoma by immunohistochemistry using a tissue micro array[j]. blood, 2004 ,103(1):275282.

[9]tzankov a, pehrs ac,zimpfer a,et stic significance of cd44 expression in diffuse large b cell lymphoma of activated and germinal centre b celllike types: a tissue microarray analysis of 90 cases [j]. j clin pathol,2003,56(10):747752.

[10]muris jj , meijer cj, vos w, et al. immunohistochemical profiling based on bcl2, cd10 and mum1 expression improves risk stratification in patients with primary nodal diffuse large b cell lymphoma[j].j pathol, 2006,208(5):714723.

[11]berglund m, thunberg u,amini rm, et tion of immunophenotype in diffuse large bcell lymphoma and its impact on prognosis[j]. mod pathol, 2005,18(8):11131120.

[12]barrans sl, carter i,owen rg,et al center phenotype and bcl2 expression combined with the international prognostic index improves patient risk stratification in diffuse large bcell lymphoma[j]. blood,2002,99(4):11361143.

[13]zinzani pl,martelli m,magagnoli,et al. how do patients with aggressive nonhodgkin's lymphoma treated with thirdgeneration regimens (macopb and fmachop) fare in the longterm? [j].haematologica,1999,84(11):9961001.

[14]drillenburg p,wielenga vj,kramer mh,et al. cd44 expression predicts disease outcome in localized large b cell lymphoma[j]. leukemia,1999,13(9):14481455.

[15]dogan a,bagdi e,munson ph,et al. cd10 and bcl6 expression in paraffin sections of normal lymphoid tissue and bcell lymphomas[j].am j surg pathol,2000,24(6):846852.

[16]colomo l, lopezguillermo a,et al. clinical impact of the differentiation profile assessed by immunophenotyping in patients with diffuse large bcell lymphoma[j]. blood, 2003 ,101(1):7884.

[17]cattoretti g,chang cc,cechova k,et al. bcl6 protein is expressed in germinalcenter b cells[j].blood,1995,86(1):4553.

  中国论文网(www.lunwen.net.cn)免费学术期刊论文发表,目录,论文查重入口,本科毕业论文怎么写,职称论文范文,论文摘要,论文文献资料,毕业论文格式,论文检测降重服务。 返回医疗卫生列表

展开剩余(
引入循环提高肿瘤学临床带教质量论文上一篇: 返回列表下一篇:

继续阅读

热门标签