【关键词】 盖塔病毒;igm抗体;igg抗体
甲病毒属是虫媒病毒家族中的重要一员,在自然界中大多数甲病毒属感染多发生在鸟类、鼠类、爬行动物和两栖类动物。在自然宿主中常表现为无症状的长期的、高滴度的病毒血症,以利于蚊虫的传播,甚至传播到人和家畜引起流行,发生不明原因的发热和炎症,包括皮炎、关节炎、肌炎或脑炎、流产等,严重的可引起死亡[1]。盖塔病毒作为甲病毒属成员之一,也是我国最早分离到的甲病毒。在我国虫媒病毒研究史上具有重要的地位[2]。1964年首次在海南分离到m1株,但直到1992年才在美国疾病预防控制中心虫媒中心得到鉴定[3,4]。2002年在我国涉县第二次分离到至少2株盖塔病毒(hb02153和hb0234)[5]。为了解盖塔病毒对人群的感染情况,于分离病毒的当年采集了部分正常人群血清进行筛查,现将筛查结果分析如下。
1 材料与方法
1.1 标本收集
于2002年夏季采集蚊标本的同时,采集正常人群血标本,静脉采血,分离血清,-20℃保存备检。采集地点为涉县各乡村。
1.2 检测指标
盖塔病毒igm和igg抗体。
1.3 检测方法
1.3.1 igm抗体检测:采用抗体捕捉elisa方法检测igm抗体。包被抗人igmμ链,4℃过夜,封闭,加稀释待检血清,37℃温育,洗涤后加单克隆抗体酶标结合物,37℃温育,洗涤后37℃避光显色。包被液为碳酸钠和碳酸氢钠缓冲液,洗涤液为0.5% tween生理盐水,底物缓冲液为柠檬酸、碳酸氢钠缓冲液,封闭液为10%胎牛血清的洗涤液,终止液为2m硫酸,底物为h2o2和邻苯二胺,490 nm测定od值,判定标准为待检血清od值与阴性血清od值之比≥2.1为阳性,阴性血清孔od值不足0.05时按0.05计算。
1.3.2 igg抗体检测:采用间接elisa方法检测盖塔病毒igg抗体。检测步骤包括包被抗原,4℃过夜,洗涤后加待检血清,37℃温育,洗涤后加酶标抗人igg抗体,37℃温育,洗涤后37℃显色。包被液、底物缓冲液、终止液、底物及检测条件和结果判定标准均与igm抗体相同。
1.3.3 病毒抗原:以在涉县分离到的盖塔病毒感染细胞制备病毒全抗原。
2 结果
2.1 血清标本采集
采血时间为2002年7、8、9月,采血数量为300份,男女比例为137∶163。
2.2 血标本年龄分布
采血对象年龄范围为1~30岁,分为6个年龄组,1岁~,5岁~,10岁~,15岁~,20岁~,25~30岁。
2.3 采血对象地区分布
采血对象分布于涉县3个乡镇的4个村,在这4个村分别采集102份、89份、84份和25份血清,其中分离到盖塔病毒的2个乡镇分别采集114份和84份血清。
2.4 检测结果
经实验室检测,300份血清中只有1份igm抗体阳性,od值为0.185,阳性率为0.30%,该血清分布在25~30岁年龄组;300份血清中有49份血清igg抗体阳性,阳性率为16.30%,igg抗体阳性血清也分布在大年龄组。
3 讨论
检测结果显示,在河北省涉县盖塔病毒循环地区,30岁以下人群盖塔病毒总感染率为16.67%(50/300),在自然界循环中,盖塔病毒不仅感染人而且感染率还比较高,盖塔病毒感染人类主要在大年龄组人群。但盖塔病毒感染人类后是否引起发病,临床表现如何,30岁以上人群感染率多大,或总人群感染率多大,有待进一步研究。
由于以往的研究表明,甲病毒的分离主要出现在南方和新疆等地,这次在我国北方地区分离到盖塔病毒并发现感染人类,而且感染率如此之高具有重要的流行病学意义,为进一步研究盖塔病毒的流行病学奠定了基础和提供了宝贵的资料。
以往海南和广东11个地区盖塔病毒血清抗体检测结果表明,广东省未发现盖塔病毒抗体阳性者;海南省的6个地区中只有琼中地区发现有盖塔病毒抗体阳性,阳性率分别为1.95%和2.37%[6,7]。然而,此次对河北省涉县人群盖塔病毒感染率调查中,正常人群的总感染率为16.67%,显著高于海南琼中地区的感染率,结果具有重要的流行病学意义。
【参考文献】 1 方美玉,林立辉,任瑞文.我国甲病毒的研究进展.中华流行病学杂志,2003,24:10601063. 2 赵文忠,罗招凡,刘建伟,等.一株鹭山病毒的分子生物学鉴定.热带医学杂志,2006,6:700701,681. 3 杨火,饶颐年,陈日光,等.海南岛一株甲组虫媒病毒的分离、鉴定和血清抗体调查.中华微生物和免疫学杂志,1984,4:107111. 4 li xd,qiu fx,yang h,et ion of getah virus from mosquitoes collected on hainan island,china,and results of a ast asian j trop med public health,1992,23:730734. 5 王焕琴,刘卫滨,杨冬荣,等.河北省虫媒病毒分离鉴定.中华实验和临床病毒学杂志,2006,20:5255. 6 白志军,彭翼飞,林立辉,等.广东、海南两省人血清12种虫媒病毒抗体调查.中国人兽共患病杂志,2000,16:8384. 7 赵春生,白志军,彭翼飞,等.我国南方人鼠媒病毒血清流行病学调查.中国公共卫生,2000,17:6466.
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