实用乳腺细胞病理学，乳腺穿刺细胞学检查结果分析

今天中国论文网小编为大家分享毕业论文、职称论文、论文查重、论文范文、硕博论文库、论文写作格式等内容. 印片细胞学及dna倍体分析对乳腺疾病的诊断价值

【关键词】 印片细胞学;dna倍体分析;乳腺疾病

【摘要】 目的 探讨组织印片细胞学与dna倍体分析对乳腺疾病良恶性的诊断价值。方法 通过组织印片细胞学及dna倍体全自动图像分析仪分别对80例乳腺疾病的良恶性作出诊断，与常规石蜡切片病理诊断及免疫组化结果进行比较。结果 组织印片细胞学对乳腺疾病良恶性诊断的特异性为92.7%,敏感性72%，准确率86.25%;dna倍体分析的特异性为100%，敏感性92%，准确率97.5%。结论 组织印片细胞学和dna倍体分析对乳腺疾病良恶性的诊断具有较高的价值。

【关键词】 印片细胞学;dna倍体分析;乳腺疾病

乳腺肿瘤是女性的常见疾病，包括良性、交界性及恶性病变。这些病变中有些无论从临床上、大体上，还是显微镜下均较难确定其良恶性。而细胞dna含量反映了细胞的状态，其含量测定对肿瘤性质的判定具有重要意义。以往研究多采用的流式细胞仪对乳腺癌进行dna倍体分析〔1〕。现在已有应用dna倍体全自动图像分析仪判断乳腺肿瘤性质的研究〔2〕。印片细胞学已在乳腺肿瘤术中诊断得到应用〔3〕。本文通过dna倍体全自动图像分析仪、印片细胞学对乳腺肿瘤的性质进行判断，探讨组织印片细胞学与dna倍体分析对乳腺疾病良恶性的诊断价值。

　　1 材料与方法

　　1.1 材料

　　对80例乳腺疾病患者术中送检的标本进行组织印片，每例标本做2张印片，分别用于组织印片细胞学检查和印片细胞的dna倍体分析。同时充分取材进行常规组织病理检查。

　　1.2 方法

　　1.2.1 组织印片细胞学方法

　　用载玻片在术中送检的肿块的新鲜剖面上病变典型处轻轻按压组织数次，使载玻片与组织切面均匀密切接触，切忌推拉，取足够量细胞，制成细胞学印片，自然干燥，95%的酒精固定10 min，苏木素伊红(he)染色，清水冲洗干净后，封片后阅片。

　　1.2.2 印片细胞的dna倍体分析方法

　　采用全自动图像分析仪测定法。组织印片，feulgen染色，每例feulgen染色切片在20倍物镜下的肿瘤区域任意选择10个光镜视野作为待测细胞，以同例肿瘤组织中淋巴细胞核dna含量平均值为二倍体对照值进行测定，经摄像系统输入计算机内进行dna倍体分析。人为的去掉那些看上去为重叠核或染色中的杂质以保证测定的准确性。

　　1.2.3 常规组织病理方法

　　充分取材，脱水，石蜡包埋，切片，he染色。对病理诊断为可疑恶性的进行免疫组化染色。

　　1.3 统计学处理

　　应用spss 13.0统计软件进行处理，两组数据间率的比较用χ2检验。

　　2 结 果

　　2.1 印片细胞学

　　诊断标准〔4〕：①细胞成分多样,细胞排列规则,胞质丰富,细胞核圆或卵圆,核仁不明显为良性;②见到少量单个核大、深染、轻度异型的细胞为可疑恶性;③细胞弥漫或成团分布,成分相对单一,细胞大小不等,胞核明显增大,核染色质不均,核仁明显为恶性。见图1。根据以上标准印片细胞学诊断将80例分为3组：①55例良性病变;②7例为可疑恶性病变;③18例为恶性。见表1。

　　2.2 全自动图像分析仪测定法

　　诊断标准：①正常2倍体(dna定量为2c)细胞为主，未见异倍体细胞及异倍体细胞峰，为阴性;②出现3个或3个以上>5 c的细胞或出现异倍体细胞峰，诊断为阳性。见图2～图4。根据以上标准将80例分为2组：①55例未见dna倍体异常细胞，2例中1例出现1个细胞>5 c，1例出现2个细胞>5 c但未达到阳性标准,诊断为阴性;②23例为阳性。见表1。

　　2.3 根据who乳腺肿瘤诊断标准将80例常规石蜡切片分为两组

　　①55例良性，包括纤维腺瘤、乳腺腺病、导管内乳头状瘤、腺病伴纤维腺瘤形成、乳腺腺瘤、炎症性病变。②恶性病变25例，包括浸润性导管癌、浸润性小叶癌、导管内原位癌、黏液腺癌。

　　2.4 组织印片细胞学分析 对乳腺疾病良恶性诊断的特异性为92.7%，敏感性72%，准确率86.25%;dna倍体分析的特异性为100%，敏感性92%，准确率97.5%，具有统计学差异(p<0.05)。见表2。表1 印片细胞学、dna倍体分析与组织学结果对比表2 印片细胞学与dna倍体分析的统计学比较　图1 细胞成团、异型性明显(×400)图2 正常2倍体单峰图3 可见大量dna倍体异常细胞图4 可见dna异倍体多峰

　　3 讨 论

　　肿瘤细胞的生长特点是dna含量增高，细胞癌变的本质是细胞迅速无限增殖和转移，测定细胞核dna含量，可作为恶性肿瘤的指标〔5〕。良性肿瘤是以4倍体增多，恶性肿瘤是非整倍增多，因此测定肿瘤细胞核dna含量可以判断肿瘤的良、恶性〔6〕。本材料中通过应用全自动图像分析仪测定肿瘤的dna含量，对肿瘤良恶性的诊断的准确率97.5%。有文献报道肿瘤异倍体的检出率高于病理组织学诊断的阳性率，两者互补，有助于早期诊断，避免或减少癌症的漏诊〔7〕。

　　本研究中印片细胞学诊断是介于组织切片与脱落细胞学涂片之间的一种诊断方法，能减少人工变形，具有结构清晰、组织受检面广、操作简单、诊断快、准确率较高等优点。本材料中其准确率为86.25%，可见组织印片细胞学对肿瘤良恶性的诊断具有重要意义。但印片属于细胞学范畴，着重根据细胞大小、核浆比例、核染色深浅等变化来诊断，这对于需要结合生物学行为及组织学结构或需要根据是否存在胞膜浸润而定性的肿瘤来说，印片细胞学显得具有局限性。

　　而肿瘤细胞的dna倍体分析可以弥补印片细胞学的局限性，可以获得单纯从形态上难以判断的肿瘤生物学特征，为用形态学评估肿瘤生物学特性提供了必要的补充。本文乳腺恶性病变的组织印片中，4例被诊断为良性，1例是由于印片质量的原因，未能获取足够量的肿瘤细胞;1例是由于肿瘤坏死或分泌物较多，印片中这样背景过强，瘤细胞减少，导致诊断为良性;2例常规石蜡证实分别为黏液腺癌和浸润性小叶癌。黏液腺癌的形态特点是细胞呈簇状漂浮在黏液湖内，细胞簇常由形态一致的圆形细胞组成，接近正常腺上皮。由于黏液腺癌的这样的组织学特点，难以与良性上皮细胞鉴别。乳腺浸润性小叶癌的组织学的特点，癌细胞一般较小，大小较一致,细胞间缺乏黏附性。癌细胞不易与炎细胞及间质细胞区分，导致诊断为良性病变。良性病变中被诊断为可疑恶性的4例及恶性肿瘤中被诊断为可疑恶性的3例，是由于印片中多为成片脱落的细胞团，有的细胞团可见双极裸核的肌上皮，不易与导管内乳头状瘤相鉴别以及常规石蜡证实为局灶癌变。而dna倍体分析则排除了假阴性及假阳性的诊断结果，良性肿瘤中印片细胞学诊断为可疑恶性的4例，dna倍体分析为正常2倍体单峰;恶性肿瘤中，印片为良性及可疑恶性的7例，dna倍体分析6例出现了大量大于5 c的细胞，1例由于印片质量的原因出现了假阴性。组织学诊断为恶性病变中的2例，dna倍体分析都出现了>5 c的细胞，但未达到阳性标准，考虑可能是由于印片质量的原因。

　　本研究中采用的是全自动图像分析仪，与流式细胞仪法相比，其具有标本制作程序简单，检测结果精确，因为标本为组织印片，所以具有很好的重复性及可控制性。全自动图像分析仪能在显微镜下对每一个细胞做出逐个测量，在dna检测的同时能对细胞形态参数，如核面积等做出准确的测量〔8〕。目前，dna倍体全自动图像分析仪已经应用于呼吸系统如恶性浆膜腔积液的诊断〔9〕;女性生殖系统，如宫颈癌的筛查与诊断〔10〕;男性泌尿生殖系统，如dna倍体分析结合尿液细胞学检查对可疑膀胱癌患者的诊断等〔11〕。但dna倍体分析应用到手术中冰冻诊断的辅助诊断方法尚属首次尝试，通过与组织石蜡切片阳性率的比较，试图探索出提高术中冰冻诊断准确性的一条新路。而且随着影像技术及术前活检技术的发展,dna倍体分析可为术前正确诊断提供有力的证据。

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