【摘要】 目的 对光果金樱子和金樱子进行质量研究,并比较其异同,为金樱子质量标准的完善及光果金樱子资源的综合开发利用提供 参考 。方法 采用性状、显微、薄层色谱法进行定性鉴别;采用苯酚硫酸法进行多糖的含量测定。结果 除光果金樱子果实光滑无刺外,二者的性状基本一致,显微特征和薄层色谱行为相似;光果金樱子多糖质量分数为(36.42±0.05)%,金樱子多糖的平均质量分数为38.46%。结论 光果金樱子外观性状、显微特征、薄层色谱行为和多糖含量与金樱子相似,有可能作为金樱子的来源。
【关键词】 金樱子;光果金樱子;质量研究;多糖;性状;显微;薄层色谱
(department of life science/research institute of biotechnology,huizhou college,huizhou,guangdong 516007,china)abstract:objective to improve the quality standard of rosa laevigata michx. and provide reference for comprehensive exploitation and utilization on rosa laevigata var. s macroscopic,microscopic and tlc were used for identification,and phenolsulfuric acid method was used to determine the content of s both rosa laevigata var. leiocarpus and rosa laevigata michx. presented resemblance in appearance,microstructure and tlc behavior except that the fruits of rosa laevigata var. leiocarpus have a smooth surface without any average polysaccharide content of rosa laevigata var. leiocarpus was (36.42 ± 0.05)%,and that of rosa laevigata 38.46%.conclusion rosa laevigata var. leiocarpus and rosa laevigata similar on appearance,microscopic structure,tlc and polysaccharide laevigata var. leiocarpus may be a new source of rosa laevigata michx.
key words:rose laevigata michx.; rosa laevigata var. leiocarpus;quality research; polysaccharide; appearance; microscopic structure;tlc
金樱子为蔷薇科植物金樱子rosa laevigata michx.的干燥成熟果实,10~11月果实成熟变红时采收,干燥,除去毛刺。其味酸、甘、涩,性平,归肾、膀胱、大肠经,具有固精缩尿、固崩止带、涩肠止泻的功效,用于遗精滑精、遗尿尿频、崩漏带下、久泻久痢等[1]。光果金樱子rosa laevigata var. leiocarpus为蔷薇科植物金樱子的变种,为广东省特有的植物品种,与金樱子相比变异点在于叶稍薄,果光滑无刺[2-3]。
《 中国 药典》规定金樱子作为金樱子药材来源,而没有收载光果金樱子。光果金樱子与金樱子植物亲缘相近,可能具有相似的化学成分和功效,但目前尚未见相关研究报道。光果金樱子表面光滑,采收加工时不需除刺,如能作为金樱子药材来源,可大大降低劳动成本,提高生产效率。因此,本文对光果金樱子和金樱子进行质量比较研究,为完善金樱子的质量标准和综合开发利用光果金樱子资源提供参考。
1 仪器与试药
1.1 仪器
fa1104a 电子 天平(上海精天电子仪器有限公司);df20流水式高速中药粉碎机(温岭市大德中药机械有限公司);超声波清洗仪(东莞市三源超声波设备有限公司,频率80 khz,功率200 w);723e紫外可见分光光度计(天津喀纳斯光学分析仪器有限公司);1600x生物显微镜(上海浦东物理光学仪器有限公司),hhs2水浴锅(江苏省金坛市环宇 科学 仪器厂)。
1.2 试药
无水葡萄糖为分析纯,于105 ℃烘干至恒重备用;薄层层析用硅胶g(青岛市市北区海化干燥剂厂);其余试剂均为分析纯。
光果金樱子于2009年12月下旬采自惠州市象头山国家 自然 保护区,经惠州学院生命科学系柴素芬副教授鉴定为蔷薇科植物光果金樱子rosa laevigata var. leiocarpus的成熟果实,于烘箱中50 ℃干燥,粉碎。金樱子经惠州学院生命科学系柴素芬副教授鉴定为蔷薇科植物金樱子rosa laevigata michx.的干燥成熟果实,于烘箱中50 ℃干燥,粉碎,来源见表1。
2 方法与结果[1,4]
2.1 性状鉴别
金樱子为花托发育而成的假果,呈倒卵形,长2~3.5 cm,直径1~2 cm。表面红黄色或红棕色,有突起的棕色小点,系毛刺脱落后的残基。顶端有盘状花萼残基,中央有黄色柱基,下部渐尖。质硬。切开后,花托壁厚1~2 mm,内有多数坚硬的小瘦果,内壁及瘦果均有淡黄色绒毛。气微,味甘、微涩。与金樱子相比,光果金樱子外表光滑无刺,表面没有毛刺脱落后形成的棕色突起小点,其他同金樱子。
2.2 粉末显微鉴别
金樱子 ①非腺毛:淡黄色,多单细胞,长505~1836 μm,直径 16~31 μm,中央膨大呈囊状,有孔沟,表面常有螺旋状的斜条纹,胞腔内含黄棕色物。②表皮细胞:表面观多角形,壁厚,内含黄棕色物。③下皮细胞:表面观类方形或类多角形,直径15~36 μm。④草酸钙方晶,多见,长方形或不规则棱状,直径16~40 μm,簇晶少见。⑤导管:多为螺纹、环纹,少网纹、具缘纹孔导管,直径 8~20 μm。⑥薄壁细胞:多角形,木化,具纹孔,含黄棕色物。⑦纤维:黄色,长梭形或条形,多成束,壁木化,孔沟明显,长约1 071 μm,直径 16~20 μm。⑧树脂块:不规则形,黄棕色,半透明。⑨果实表皮刺纵切面:外表皮细胞1列,切向延长或类方形,小。下皮层细胞径向延长。 光果金樱子 ①非腺毛:单或多细胞,长505~1 840 μm,直径10~30 μm,壁厚或较薄,木化或微木化,表面常有略弯曲的斜条纹,胞腔内含黄棕色物。②导管:多为环纹。③纤维:长至1 070 μm,直径16~20 μm,壁木化,多为条形,梭形少见。④表皮细胞、下皮细胞、草酸钙方晶、薄壁细胞、树脂块等同金樱子。
2.3 薄层色谱鉴别
分别取光果金樱子、不同来源金樱子粉末2 g,各加乙醇30 ml,超声处理30 min,滤过,滤液蒸干,残渣加水20 ml使溶解,用乙酸乙酯振摇提取2次,每次30 ml,合并乙酸乙酯液,蒸干,残渣加甲醇2 ml使溶解,作为供试品溶液。参照薄层色谱法(2010年版《
2.4.1 对照品溶液的制备 取经105 ℃干燥至恒重的无水葡萄糖60 mg,精密称定,置100 ml量瓶中,加水溶解并稀释至刻度,摇匀,即得(每1 ml中含无水葡萄糖0.6 mg)。
2.4.2 线性关系的考察 精密量取对照品溶液1.5、3.0、4.5、6.0、7.5 ml,分别置50 ml量瓶中,加水至刻度,摇匀。分别精密量取上述溶液2 ml,置具塞试管中,各精密加4%苯酚溶液1 ml,混匀,迅速精密加入硫酸7 ml,摇匀,于40 ℃水浴中放置30 min,取出,置冰水浴中放置5 min,取出,以相应试剂为空白,照紫外可见照分光光度法(2010年版《中国药典》附录ⅴ a),在490 nm的波长处测定吸光度,以吸光度(a)为纵坐标,无水葡萄糖质量浓度(ρ)为横坐标,绘制标准曲线。得回归方程为a=5.7×10-2ρ-5.4×10-3,r=0.999 5,结果表明无水葡萄糖在0.00~18.00 μg·ml-1之间线性关系良好。
2.4.3 样品测定 取光果金樱子及金樱子粗粉约0.5 g,精密称定,置具塞锥形瓶中,精密加水50 ml,称定重量,静置1 h,加热回流1 h,放冷,再称定重量,用水补足减失的重量,摇匀,滤过,精密吸取续滤液1 ml,置100 ml量瓶中,加水至刻度,摇匀,精密量取25 ml,置50 ml量瓶中,加水至刻度,摇匀,精密量取2 ml,置具塞试管中,按照“2.4.2”项下的方法,自“各精密加4%苯酚溶液1 ml”起,依法测定吸光度,从标准曲线上读出供试品溶液中多糖的质量(μg), 计算 ,即得。光果金樱子多糖质量分数为(36.42±0.05 )%,来源不同的金樱子多糖含量稍有不同,平均质量分数为38.46 %,结果见表1。表1 金樱子中多糖含量测定结果
3 讨论
光果金樱子果实表面光滑无刺,金樱子果实表面有皮刺。采收加工后,光果金樱子表面无突起的棕色小点,而金樱子表面有突起的棕色小点,可以作为二者的外观性状鉴别的依据。金樱子的“刺”为植物体表皮向外突起形成的皮刺,由外表皮细胞1列切向延长和下皮细胞径向延长而成[5-6]。由于金樱子在采收加工时进行了除刺处理,并且粉碎后与果实花托壁的表皮细胞和下皮细胞混合,在普通显微镜下难以分辨,故皮刺难以作为二者的显微鉴别依据。
薄层色谱结果显示,光果金樱子与金樱子在相同的位置上,显6个相同颜色的斑点,说明在所选用的薄层色谱条件中,光果金樱子与金樱子显示了相似的化学性质,进行多种色谱条件鉴别研究或系统的化学成分分析有助于了解二者化学成分的异同。
多糖含量是金樱子质量优劣的一个重要指标,实验结果显示光果金樱子和金樱子多糖含量均高于药典要求的25.00%[1,4],质量较好。
光果金樱子是广东省新发现的植物资源,分布在海拔大约800 m的惠州市博罗县国家象头山 自然 保护区内。资源分布较少,样品采集较困难,因此本实验光果金樱子仅采集到一个样品,实验样本较少,有待于收集更多的样品进行深入研究。
致谢:
感谢广东省惠州市象头山国家自然保护区在提供光果金樱子实验材料等方面提供帮助,感谢惠州市南天生物科技有限公司在采集样品时提供帮助。
【 参考 文献 】
[1] 国家药典委员会.中华人民共和国药典:2010年版一部[m].北京:
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