【摘要】 总结spf级动物屏障系统的运营管理经验，包括屏障系统设施的维护，饲料质量的保证，大小鼠的饲养操作执行情况，实验动物质量的保证等几个方面。
【关键词】 spf； 屏障系统； 管理
作者简介：王永金，男，研究实习员，主要从事医学实验动物工作，email:wangyongjin666@ 随着医学和生命科学等高新技术的飞跃发展，人类对实验动物的要求也愈来愈高。我所是一个从事中药新药的研究单位，对实验动物的质量有较高的要求。在单位领导的重视和关心下，我所于2002年建立了spf级动物屏障系统，在2005年取得了spf级大鼠和小鼠的生产许可证。三年来，我们严格按照屏障系统设施标准操作规范进行生产管理，以确保动物的质量,现将这三年spf级动物屏障系统的运营管理总结一下,以便广大同行探讨和指正。
1屏障系统设施的运行和维护
1.1空调系统：这是屏障系统的核心，也是保持设施正常运转的重要因素。为保证该系统能正常工作，我们专门设置了一名电工技术人员专职负责此工作，严格按照空调系统控制程序与操作规程进行操作。每天检查整个机组的运行情况并记录，发现问题及时报告，以保证屏障内的温度、湿度及压差的控制平衡。每天保持机房的清洁卫生，以减少新风口空气的尘埃粒子。同时，我们还与厂方的技术人员签定了维护保养协议，由他们定时为我们的主机维护保养，以便发现问题及时解决，避免对主机造成巨大损害，延长主机寿命，保证该系统的正常运行。
1.2净化系统：该系统涉及到屏障内的空气洁净度。按规定每周对初效过滤棉进行清洗，每3个月对中效过滤棉进行清洗，高效过滤器按实际使用情况进行更换（一般为一年左右）。同时，每天清洁空调机房内的卫生，尽量减少灰尘进入新风口。
1.3 监控系统：我们有一套比较好的监控系统。我们在屏障系统内的每个房间装有半球型自动调焦摄像头，便于进行全方位观察，并配有对讲机，可以做到适时监控与交流。为便于对实验过程和动物行为进行观察，我们配备了一台硬盘录象存储器，可以连续的，大量储存影象资料。
1.4消毒灭菌：高压灭菌器的工作人员，必须取得压力容器作业人员操作证，做到持证上岗。严格按照高压灭菌器操作规程进行操作，做到消毒灭菌每锅均有记录，严格认真把关，防止因灭菌不够将病原微生物带入屏障内造成污染。
2实验动物的饲料
实验动物的生长、发育、繁殖以及体质均依赖于饲料。饲料的原料组成和营养成分应力求稳定。但对于spf级动物来说，饲料必须要灭菌，我们使用的是高压灭菌，这使得其中的营养成分不可避免地受到高温的破坏。为保持高压灭菌后，其营养成分达到标准，我们在饲料中添加了足量的复合维生素b和氨基酸，以补充饲料因高压灭菌造成维生素b族遭到的损失。经送样到有关监测部门进行检测，其营养元素含量均符合标准，三年来，动物生长繁殖良好。
3屏障内大鼠和小鼠的操作执行情况
屏障内工作人员严格执行屏障生产设施标准操作规范，如屏障区通过间使用程序、风淋室使用规程、设施内饲养人员卫生管理规程、饲养间操作规程等。动物的饲料为经高压灭菌的无菌饲料，饮用水为经粗滤、活性炭、逆渗透、超滤和紫外线处理、经加酸ph2～3的纯净酸化水，经过这三年来的运行，其使用效果较好。
4实验动物质量保证方面
参照国家有关实验动物标准，结合动物设施及生产实际对动物所需的饮水、饲料、垫料、屏障内环境设施建立了检测方法和检测制度，将检测动物质量为主转变为检测动物生存环境为主，以便能及时发现并控制病原微生物对动物的污染。
4.1饲料的检测：对每批高压灭菌饲料均进行无菌检测，分别接种肉汤和硫乙醇酸钠培养基，37 ℃下培养48小时。同时，用121 ℃化学指示剂检测消毒效果，待每批饲料检测合格后，方饲喂动物。
4.2无菌水的检测：动物饮用水经过这三年多的检测观察，我们根据自身条件和情况制定了一套饲养及检测方法。每周一、三、五所有饮水瓶全部倒空、消毒，而后将消毒好的水瓶重新灌装无菌水，同时在每周一将动物饮用水瓶中的余水进行检测，其检测结果表明，动物饮用水在水瓶中放置3天后，仍能达到无菌生长，这说明我们每周一、三、五进行水瓶的全部清洗、消毒后，再灌装纯水机制造的新鲜无菌水是可行的。同时，我们每半月对纯水机进行无菌检测，随时监控，以保证屏障内的动物质量。
4.3实验动物的垫料检测：我们外购新鲜木刨花，先经过筛子去除较小的粉末，再将垫料装入已洗净的盒子或装入口袋里进行高压消毒。我们对每批高压垫料进行消毒灭菌检测，在盒中放入高压消毒指示卡（121 ℃、20分钟），观察指示卡颜色变化的程度来确定高压灭菌的效果。对灭菌符合要求者，方可使用。
4.4屏障环境的检测：spf饲养室内落下菌和黏附菌按国家标准每季度检测一次。通过这三年饲养大、小鼠的情况，其检测结果分析发现，屏障内在有动物饲养的状态下，其空气落下菌比静态有增加，饲养室的菌落数介于20～40个/皿,经培养鉴定，菌株多为白葡萄菌、链球菌等，但这些不是spf级动物所要排除的病原菌。由于动物室空气中细菌变动的因素较多，包括温度,湿度,换气次数,动物种类和密度,换笼后的天数等,所以检测时要注意考虑这些因数的影响。
4.5实验动物的质量检测：我们在这三年多的时间里，每年要对屏障系统的大、小鼠进行微生物的抽样检测，包括细菌、病毒和寄生虫，对检测可疑者,立即进行复检。检测的结果均符合屏障系统实验动物的质量要求。
4.6动物尸体及废弃物的处理：动物尸体采取集中处理。平时将动物尸体储藏于冰柜中，定期集中运送到有关机构进行无害化处置。
5管理中关键问题
5.1领导重视：屏障系统设施的正常运转，离不开水、电、空调机组、风机机组、过滤系统、高压消毒锅等设施的合理维护，一旦出现问题，对屏障系统设施都将是毁灭性的打击，但由于这些因素涉及到多部门多专业的领域。因此，领导的理解和支持是设施正常运转的重要保证。
5.2人员管理：人员污染是屏障动物设施失败的重要原因。人与动物直接接触，其防护仅仅是洗澡和穿上灭菌衣，戴手套、口罩，裸露部位很容易对环境造成污染。因此，要严格控制人员的流动，思想要保持无菌概念，要使工作人员严格遵守操作规程才能避免对动物的污染。
5.3制定科学、切实、可行的规章制度：为保证spf动物的质量，必须制定一套科学的规章制度，结合本单位的实际情况，我们制定了屏障生产设施标准操作规范，从动物的引种程序、动物的供应程序、通过间的使用程序等，要求每一位工作人员必须严格遵守执行。工作人员的每一步操作，都必须要按照操作规程中的规定，规范化、程序化、标准化地进行。
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