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清热退热合剂(清热解毒分为几种,联合用药)

2022-11-06  本文已影响 120人 
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作者:邱枫,何晓静,肇丽梅,孙亚欣

【摘要】 目的 比较清热合剂各提取部位群的解热抗炎药效作用。方法 分别采用2,4二硝基苯酚致热大鼠模型、内毒素致热家兔模型、二甲苯致小鼠耳肿胀及蛋清致大鼠足肿胀模型,研究清热合剂各提取部位群的解热、抗炎作用。结果 清热合剂的20%、40%和60%乙醇提取部位群均有解热抗炎作用,其中清热合剂的40%乙醇提取部位群解热抗炎作用最强。结论 清热合剂的40%乙醇提取部位群具有明显解热抗炎作用,作用效果与清热合剂原液相当。

【关键词】 清热合剂;有效部位群;解热;抗炎

  abstract:objective to investigate the feverrelieving and antiinflammatory effects of qingre mixture (qr) for oral s animal models of ear edema induced by xylene in mice,paw edema induced by egg white and fever induced by 2,4dinitrophenol in rats and endotoxininduced fever in rabbits were made; the feverrelieving and antiinflammatory effects of the different extractions of qingre mixture were s extractions of qingre mixture extracted by 20%,40%,and 60% ethanol showed a marked suppressive effects on ear edema induced by xylene in mice,paw edema induced by egg white and fever induced by 2,4dinitrophenol in rats and endotoxininduced fever in rabbits,the extraction of qingre mixture extracted by 40% ethanol was the most sion extraction of qingre mixture extracted by 40% ethanol had feverrelieving and antiinflammatory effects,which were equivalent to the effects of qingre mixture.

  key words:qingre mixture; feverrelieving effect; antiinflammatory effect

 清热合剂是由黄芩、葛根、大青叶等五味中药组成的传统中药复方制剂,具有疏散风热、清热解毒、利咽止咳的功能,用于病毒性感冒或流行性感冒所见身热、头胀痛、咽喉红肿疼痛、鼻塞等症的 治疗 [1,2]。但由于合剂携带服用不便,久储有较多沉淀,外观性状较差和难以作为新药进入药品市场等缺点,本研究拟通过大孔吸附树脂对清热合剂粗提物进行分离纯化后将其研制成颗粒剂,使之药效更明确,降低不良反应的发生率。为了明确清热合剂各提取部位群的药效变化,确保其质量和疗效,本文通过建立大鼠、家兔发热模型、二甲苯致小鼠耳肿胀及蛋清致大鼠足肿胀模型,比较原清热合剂及分离纯化后各提取部位群的解热及抗炎作用,为确定清热合剂的有效部位群提供依据。

   1 材料

  1.1 药品与试剂

  清热合剂(qr,ρ=1.35 g·ml-1), 中国 医科大学附属盛京 医院 药剂科生产,批号:20071207;阿司匹林肠溶片(50 mg/片),沈阳万隆药业有限责任公司,批号:071002;醋酸地塞米松片(5 mg/片),天津药业基团有限公司,批号:070325;二甲苯,天津市科盟化工工贸有限公司,批号:050480;内毒素,规格500 ng/2500 eu/支,上海申索试剂有限公司,批号:20070417;羧甲基纤维素钠(cmcna),上海昌为医药辅料技术有限公司。

  1.2 仪器

  hhs电热恒温水浴锅:江苏红旗医疗器械厂;mc107bw型欧姆龙 电子 体温计:欧姆龙大连有限公司。

  1.3 动物

  昆明种小鼠,雌雄各半,体质量25~30 g;wistar大鼠,雄性,体质量120~150 g、180~220 g;新西兰大耳白兔,雌雄各半,体质量1.8~2.2 kg。均由中国医科大学附属盛京医院医学实验动物中心提供,合格证号:辽实动质字scxk[辽]2003013号。

  1.4 清热合剂各提取部位群 溶液的制备

  将黄芩、葛根、大青叶等五味中药各150 g,加入8倍量70%乙醇,加热回流1.5 h,趁热过滤,再加入8倍量70%(φ)乙醇,加热回流1.5 h,趁热过滤,合并两次提取液,回收乙醇至无醇味,煎煮成生药浓度为1.5 g/ml的清热合剂原液。将该清热合剂原液,经大孔吸附树脂分离,分别用3柱体积的水(水洗杂质)、20%乙醇、40%乙醇、60%乙醇、80%乙醇、95%乙醇洗脱,将各洗脱液减压蒸馏浓缩至500 ml,配成相当于生药1.5 g/ml的提取液。分别形成水(水洗杂质)a提取部位群、20%乙醇b提取部位群、40%乙醇c提取部位群、60%乙醇d提取部位群、80%乙醇e提取部位群、95%乙醇f提取部位群的6个部位群溶液。

  1.5 统计学处理

  所有数据均以(±s)表示,两组间均数比较采用t检验;多组均数间的比较采用单因素方差分析(oneway anova),多组均数间两两的比较采用q检验,以p<0.05为差异有显著性。

   2 方法与结果

  2.1 清热合剂各提取部位群对二甲苯致小鼠耳肿胀的影响[3]

  取体质量25~30 g的小鼠90只,随机分为9组,每组10只。即实验组分别灌胃( i.g.) 给予清热合剂及其各提取部位群6.0 g·kg-1,阳性对照组 i.g.地塞米松5 mg·kg-1,空白对照组 i.g.等体积的0.5% cmcna 20 ml·kg-1,连续给药3 d。末次给药后1 h,于小鼠右耳正反面均匀涂抹二甲苯30 μl /只,1 h后脱颈椎处死,用8 mm打孔器在左右耳相同部位打下耳片,扭力天平称重, 计算 肿胀度(mg)及肿胀抑制率(%)。表1 清热合剂及其各提取部位群对二甲苯致小鼠耳肿胀的影响

  与空白组比较:*p<0.05,**p<0.01 由表1可见,与空白组比较,清热合剂b、c、d提取部位群对二甲苯所致的小鼠炎性耳肿胀有明显的抑制作用(p<0.05或p<0.01),抑制率分别为23.2%、39.7%和30.4%,清热合剂c提取部位群的抑制程度与清热合剂原液、地塞米松(5 mg·kg-1)相当。清热合剂a、e、f提取部位群对二甲苯所致的小鼠炎性耳肿胀有抑制的趋势,但作用不显著(p>0.05)。

  2.2 清热合剂各提取部位群对蛋清致大鼠足肿胀的影响[4]

  取体质量120~150 g的雄性大鼠90只,随机分为9组,每组10只。即实验组分别 i.g.给予清热合剂及其各提取部位群4.0 g·kg-1, 阳性对照组 i.g.地塞米松5 mg·kg-1,空白对照组 i.g.等体积的0.5% cmcna 10 ml·kg-1,连续给药3 d。末次给药1 h后,在每只大鼠右后足跖部皮下注射(s.c.)0.1 ml的新鲜鸡蛋清,于注射蛋清前(0 h)和注射蛋清后的0.5、1 、2 、4 、6 h用毛细管放大器装置测量大鼠足容积, 计算 大鼠的足肿胀率。表2 清热合剂及其各提取部位群对蛋清致大鼠足肿胀的影响

  表2结果显示,在蛋清致炎后的0.5 h,清热合剂原液、清热合剂c提取部位群即对大鼠足肿胀有明显的抑制作用,抑制作用持续至观察结束(p<0.01或p<0.05);清热合剂b、d提取部位群起效时间较慢,但维持作用时间与清热合剂原液、清热合剂c提取部位群一致。

  2.3 清热合剂各提取部位群对2,4二硝基苯酚致大鼠体温升高的影响[5]

  取体质量180~220 g的雄性大鼠,测3 d 内大鼠正常体温,每日1次。选取体温合格的动物供试验用。实验当日,大鼠每小时测正常体温1次,连续3次,选取体温变化不超过0.3 ℃的大鼠为合格大鼠,颈背部皮下注射2,4二硝基苯酚12.5 mg·kg-1,注射后0.5 h测体温,取体温升高超过0.5 ℃以上的大鼠90只,随机分为9组,每组10只。即实验组分别 i.g.给予清热合剂及其各提取部位群4.0 g·kg-1,阳性对照组 i.g.阿司匹林200 mg·kg-1,空白对照组给予等体积的0.5%cmcna 10 ml·kg-1,分别于给药后0.5、1.0、2.0、3.0 h 测肛温1次,结果见表3。

  表3显示,与空白组比较,口服清热合剂原液、清热合剂b、c、d提取部位群对2,4二硝基苯酚致大鼠体温升高均有抑制作用,解热作用差异有显著性或极显著性(p<0.05或p<0.01);清热合剂c提取部位群对体温升高的抑制作用最强,与清热合剂原液、阳性对照药物阿司匹林相当。表3 清热合剂及其各提取部位群对2,4二硝基苯酚致大鼠体温升高的影响与空白组比较:*p<0.05,**p<0.01

  2.4 清热合剂各提取部位群对内毒素致家兔体温升高的影响[6]

  取体质量1.8~2.2 kg的新西兰大耳白兔,雌雄兼用,依照 文献 方法筛选体温合格的动物供实验用。实验当日将大耳白兔禁食1 h后,测肛温2次,间隔30 min,取其平均值作为给药前的正常体温。然后静脉注射细菌内毒素0.1 eu·kg-1,1 h后选择体温升高超过0.8 ℃的大白兔,随机分为9组,每组6 只。即实验组分别 i.g.给予清热合剂及其各提取部位群2.0 g·kg-1,阳性对照组 i.g.阿司匹林200 mg·kg-1,空白对照组给予等体积的0.5% cmcna 5 ml·kg-1,分别于给药后1.0、2.0、3.0、4.0 h测肛温1次,结果见表4。

  由表4可见,与空白对照组比较,清热合剂及其各提取部位群在给药后均有不同程度的退热作用(p<0.01或p<0.05),清热合剂原液与其c提取部位群解热作用最强,并持续观察全程,与阿司匹林的作用强度及维持时间相当。表4 清热合剂及其各提取部位群对内毒素致家兔体温升高的影响

   3 讨论

  感冒属于呼吸系统的常见病和多发病,可由细菌、病毒或细菌和病毒共同引起。中医认为本病是由外邪犯肺所致,可分风温、风热、风寒等型,治宜疏风散热、清热解毒。清热合剂有黄芩、葛根、大青叶等五味中药组成,黄芩可清热燥湿、泻火解毒,葛根则具有解肌退热、生津、透疹、升阳止泻的功效。五药合用,可清肺胃火热,发挥清热解毒的功效。

  本文考察了清热合剂及其经大孔树脂柱分离纯化后各提取部位群的解热抗炎作用。急性炎症的临床表现为局部常见红、肿、热、痛,全身症状可见发热,炎症早期的主要表现是毛细血管扩张、通透性亢进、渗出和水肿,二甲苯致小鼠急性耳肿胀的炎症以引起毛细血管扩张及通透性亢进为主,大鼠足肿胀模型则多易引起渗出、水肿。实验结果表明:清热合剂20%、40%、60%乙醇提取部位群(b、c、d提取部位群 )均有不同程度的改善大鼠足肿胀、抑制小鼠耳肿胀的作用,其中40%乙醇提取部位群的作用最为显著,与清热合剂原液相当,此结果与以黄芩苷和葛根素为指标的含量测定结果相吻合[7]。

  家兔耳缘静脉注射内毒素可通过机体生成及释放内生致热原,最终导致体温调节中枢的体温调定点上移,从而使机体产生热加强,散热降低,体温升高[8]。2,4二硝基苯酚是一种代谢刺激性物质,皮下注射后使机体代谢迅速亢奋,产热增强,引起全身发热,其发热甚为迅速,消退也快,其发热与“风热证”在某些方面相似。本研究发现,清热合剂提取部位群均可不同程度降低2,4二硝基苯酚致大鼠、内毒素致家兔的体温升高,其中40%乙醇提取部位群的作用最为显著,与清热合剂原液、阳性对照相当。

  研究结果表明:清热合剂 治疗 风温湿热型感冒可能是通过解热、抗炎等作用实现的;清热合剂40%乙醇提取部位群与清热合剂原液具有相同对抗外源性致热原引起机体发热和机体炎症反应的作用。

【 参考 文献】
 [1] 肇丽梅,张岩,韩国柱.清热合剂体外抗呼吸道合胞病毒作用[j].

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