小鼠骨质疏松实验(骨质疏松小鼠建模)

中国论文网为大家解读本文的相关内容：

作者：黄杰文，秦佳佳，张素萍

【摘要】 【目的】观察中药骨康对骨质疏松模型大鼠骨密度的影响。【方法】选用雌性sd大鼠72只，随机分为6组，分别为假手术组，模型组，尼尔雌醇组(剂量为1 mg/kg)，中药骨康高、中、低剂量组(中药高、中、低剂量组，剂量分别为96、48、24 g·kg-1·d-1)。采用双侧卵巢切除术复制骨质疏松模型，术后3个月各组分别按相应剂量给药，治疗3个月后取材，采用双能x线检测活体骨密度及离体左股骨、左胫骨骨密度。【结果】模型组活体全身及腰椎骨密度显著降低(p<005或p<001)，中药高、中剂量组及尼尔雌醇组均可显著提高活体全身及腰椎骨密度(p<005或p<001)。模型组离体左股骨的整体、股骨头区(roi 1)、股骨近端(roi 2)、股骨远端(roi 4)骨密度显著降低(p<005或p<001)，中药高剂量组可显著提高整体及roi 4的骨密度(p<005或p<001)，中剂量组可显著提高roi 4的骨密度(p<005)。模型组离体左胫骨的整体、胫骨近端(roi 1)骨密度显著降低(p<001)，中药高、中剂量组及尼尔雌醇组均可显著提高离体左胫骨的整体及roi 1骨密度(p<005或p<001)。【结论】中药骨康治疗骨质疏松的作用可能与其能提高骨密度水平有关。

【关键词】 骨康/药理学;骨质疏松/中药疗法;骨密度;疾病模型，动物;大鼠

骨质疏松症是以骨量减少、骨组织显微结构改变和骨折危险频度增加为特征的一种全身性骨骼系统疾病。由于相应的骨量减少、骨质量的降低及老年人对创伤的易感性等导致骨折危险性增加[1]。我国60岁以上的老年人骨质疏松症发病率为5989%，而每年因骨质疏松症并发骨折者约为96%，并有逐年增加的趋势[2]。随着中药对骨代谢影响研究的日趋增多和深入，中药在疗效、低毒性等方面显示出特殊的优势。本文通过应用中药骨康对骨质疏松大鼠的干预性治疗，探讨该方对去势大鼠骨密度(bmd)的改善情况。现报道如下。

　　1材料与方法

　　11动物及分组清洁级健康雌性sd大鼠72只，6月龄，体质量260～290 g，由广州中医药大学实验动物中心提供，合格证号：2003a010。全部大鼠随机分为6组，每组12只，分别为假手术组，模型组，尼尔雌醇组(剂量为1 mg/kg)，中药高、中、低剂量组(剂量分别为96、48、24 g·kg-1·d-1)。

　　12药物制备中药骨康由淫羊藿、补骨脂、丹参、黄芪等10味中药组成，其提取的药物中含生药量143 g/ml，由广州中医药大学附属骨伤科医院制剂室提供。

　　13造模[3]与给药全部大鼠麻醉后背侧入路行双侧卵巢切除术，术后常规喂养3个月后开始灌胃给药治疗，灌胃给药容积为10 ml/kg，假手术组、模型组灌服蒸馏水。中药高、中、低剂量组分别灌服相应剂量的药物，每天1次。尼尔雌醇组灌胃前配成混悬液(浓度为0167 mg/ml)，1次/周，其他时间给予蒸馏水10 ml/kg灌胃。

　　14取材在治疗3个月后处死大鼠，取左股骨、左胫骨，置入体积分数10%福尔马林溶液中固定，保存于4℃冰箱中，以备做离体骨密度检查。

　　15检测指标

　　151活体骨密度测定动物处死前1 d，采用双能x线(dexa，hologic，qdr4000型)进行全身骨密度测定，分析全身、腰椎、双髋部、双侧股骨和胫骨的骨密度变化。

　　152离体骨密度测定采用dexa双能x线测定左股骨、左胫骨骨密度。在分析股骨、胫骨骨密度结果时，按文献报道[4]，将股骨分为股骨头区(roi 1)、股骨近端干骺端(roi 2)、股骨中端(皮质骨区，roi 3)、股骨远端干骺端(roi 4)4个感兴趣区，胫骨分为胫骨近端干骺端(roi 1)、胫骨中端(皮质骨区，roi 2)、胫骨远端干骺端(roi 3)3个感兴趣区。

　　16统计学方法采用spss 130统计软件进行数据的分析。

　　2结果

　　21各组大鼠活体各部位bmd比较由表1可见，绝经后骨质疏松大鼠模型复制成功后，经过3个月的治疗，中药各剂量组及尼尔雌醇组全身、腰椎及髋部骨密度均有不同程度的改善。其中尼尔雌醇组及中药高、中剂量组全身及腰椎的bmd与模型组比较差异有显著性意义(p<005或p<001)。中药高、中剂量组双髋骨密度较模型组均有升高趋势，但差异无显著性意义(p>005)。提示中药骨康可不同程度地提高全身及腰椎bmd，在提高去势大鼠全身及局部bmd方面，中药骨康具有与西药尼尔雌醇相类似的治疗作用。中药高、中、低剂量组及尼尔雌醇组对模型大鼠左、右股骨及胫骨bmd均无明显影响。表1各组大鼠活体各部位bmd比较(

　　22各组大鼠离体左股骨bmd比较从表2可见，各组大鼠左股骨roi 3的bmd比较差异均无显著性意义(p>005)。模型组roi 1、roi 2、roi 4等3个区域的bmd显著降低(p<005或p<001)，表明大鼠切除卵巢后此3个区域骨丢失严重，为最敏感区。中药高剂量组可显著提高整体及roi 4的bmd(p<005或p<001)，中剂量组可显著提高roi 4的bmd(p<005)，表明中药骨康可不同程度提高股骨整体的bmd，尤其对roi 4区域的作用明显。表2各组大鼠离体左股骨bmd比较

　　23各组大鼠离体左胫骨bmd比较从表3可见，各组大鼠左胫骨roi 3的bmd比较差异均无显著性意义(p>005)。模型组整体及roi 1区的bmd显著降低(p<001)。中药高、中剂量组及尼尔雌醇组均可显著提高整体及roi 1的bmd(p<005或p<001)，中药高剂量组还可显著提高roi 2的bmd(p<005)，表明中药骨康可不同程度提高胫骨整体的骨密度，尤其对roi 1区域的作用明显，其作用与尼尔雌醇相仿。表3各组大鼠离体左胫骨bmd比较

　　3讨论

　　骨密度测定法是早期诊断骨质疏松症、预测骨质疏松性骨折的可靠方法。研究表明[5]，骨密度与骨强度有较高的相关性，并有较高的骨折预测价值。目前认为双能x射线吸收法是骨质疏松症诊断最准确和最有价值的方法，国际上骨质疏松症的诊断也主要采用双能x线吸收法进行测量。

　　骨质疏松症属于中医学的“骨痿”范围，主要与肾虚、脾虚和血瘀有关。其病机特点可概括为多虚、多瘀、多系统、多脏器的全身性骨骼疾病，治疗的主要原则是补肾壮骨、健脾益气、活血通络。骨康方以补骨脂补肾助阳壮骨为君药，辅之淫羊藿、熟地、白芍补肾滋阴益精为臣药，此乃“善补阳者，必于阴中求阳”和“壮水之源，以制阳光”之意。同时配以黄芪补中益气，丹参、当归活血通络，共为佐药，既培补后天生化之源以充肾精，又达到补中寓通、补而不滞的目的。

　　本研究以中药骨康对去势大鼠进行干预治疗，通过测量治疗前后骨密度的变化发现该方能提高活体去势后大鼠全身骨密度及腰椎骨密度，且双髋骨密度均有升高趋势，说明中药骨康作用与尼尔雌醇相似。同时，该方亦能提高离体股骨及离体胫骨整体的骨密度，可能具有性激素样作用，与前期研究[6]结论一致。该方是否可以直接作用于成骨细胞和破骨细胞，抑制骨吸收，促进骨形成，尚有待进一步研究证实。

【参考文献】
　　[1]lane n iology，etiology，and diagnosis of osteoporosis[j].am j obstet gyneco1,2006,194(2 supp1):s3.

　　[2]罗毅文，黄宏兴，刘海全，等.中医药治疗骨质疏松症的研究进展[j].湖南中医杂志，2003,19(4):60.

　　[3]王晓，梅其炳，刘莉,等.骨质疏松动物模型的复制与评价[j]. 中国骨质疏松杂志，2007，13(2)：141.

　　[4]程云英,卢守莲,任摹兰,等. 卵巢摘除大鼠外周血单核细胞er mrna表达与骨小梁退变的相关研究[j]. 中国骨质疏松杂志,2000,6(3):31.

　　[5]vokes t j， giger m l， chinander m r， et raphic texture analysis of densitometergenerated calcaneus images differentiates postmenopausal women with and without fractures[j]. osteoporos int，2006，17：1472.

　　[6]庄洪, 魏合伟, 林一峰. 中药骨康含药血清中类雌二醇样物质含量的测定[j]. 中医正骨, 2003，15 (11):mental study on gukang in improving bone mineral

　　中国论文网(www.lunwen.net.cn)免费学术期刊论文发表,目录,论文查重入口,本科毕业论文怎么写,职称论文范文,论文摘要,论文文献资料,毕业论文格式,论文检测降重服务。 返回医疗卫生列表