非小细胞肺癌组织和生存素的表达及意义是(非小细胞肺癌中最常见的是)

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【关键词】 癌　非小细胞肺　环氧化酶2　生存素　免疫组织化学

【摘要】 　　目的 探讨非小细胞肺癌(nsclc)组织中环氧化酶2(cox2)和生存素（survivin)的表达及其临床意义。方法 应用免疫组织化学方法，检测65例nsclc中cox2和survivin表达，结合临床病理指标及随访资料进行研究分析。结果 在nsclc中cox2和survivin表达阳性率分别为70.8%（45/65）和66.2%(43/65)。cox2和survivin表达均与nsclc的ptnm分期、病理分级、淋巴结转移和病人预后有关（χ2=4.32～9.35，p<0.05）。nsclc组织中cox2表达与survivin表达呈明显正相关（r=0.41，p<0.05）。结论 nsclc组织中cox2与survivin表达密切相关,两者均可作为预测肺癌转移和评估病人预后的参考指标。

【关键词】 癌　非小细胞肺　环氧化酶2　生存素　免疫组织化学

　　expressions of cox2 and survivin in nonsmall cell lung cancer

　　gu huaping (department of pathology, hospital 251 of pla, zhangjiakou 075000, china);

　　［abstract］ objective to study the clinical significance of the expressions of cox2 and survivin in nonsmall cell lung cancer (nsclc). methods the immunohistochemical method was used to detect the expressions of cox2 and survivin in 60 cases of nsclc, and the result was analysed. results in nsclc, the positive expression rates of cox2 and survivin were70.8% (45/65) and 66.2% (43/65), respectively. the expressions of those two were correlated with ptnm staging, pathology grading, lymph node metastasis and prognosis (χ2=4.32-9.35,p<0.05). the expression of cox2 was positively correlated with that of survivin (r=0.41,p<0.05). conclusion the expression of cox2 is closely correlated with that of survivin, both of the extressions can be regarded as an important index for predicting the metastasis and prognosis of nsclc.

　　［key words］ carcinoma, nonsmallcell lung; cyclooxygenase 2; survivin; immunohistochemistry

　　肺癌是呼吸道常见恶性肿瘤之一，其发生发展是一个复杂的过程，与多个基因或多个分子水平变化密切相关。本文采用免疫组化方法，检测非小细胞肺癌(nsclc)组织中环氧化酶2(cox2)和生存素（survivin)蛋白的表达，并结合临床随访资料进行分析，探讨其表达与nsclc侵袭转移和病人预后的关系。

　　1 材料与方法

　　1.1 材料

　　1.1.1 标本

　　我院手术切除nsclc标本65例，其中腺癌40例，鳞癌25例。选择离癌组织1.0 cm的正常支气管黏膜和肺组织各10例作为对照。65例病人均有满5年完整随访资料。

　　1.1.2 试剂

　　鼠抗人cox2、survivin单克隆抗体和lsab试剂盒购自福州迈新生物技术公司（均为即用型）。

　　1.2 方法

　　1.2.1 免疫组织化学染色

　　采用微波链霉菌素生物素(mwlsab)免疫组织化学法和微波金属盐抗原修复技术,即将切片常规脱蜡水化后,放入枸橼酸缓冲液(pbs,10 mmol/l,ph 6.0)内,用微波仪170 w辐射5 min,冷却后水洗。其他操作流程同常规lsab法,所不同者为三步抗原孵肓和正常血清封闭用微波仪130 w分别辐射5 min（37 ℃）,保温2 min即可。实验用已知cox2和survivin阳性结直肠癌组织作阳性对照，用封闭血清代替一抗作为阴性对照。h2o2dab显色。

　　1.2.2 结果判断

　　cox2和survivin均以细胞质显示棕黄色颗粒为阳性。根据免疫组化染色的每例切片中显色有无及显色癌细胞的比例判定阳性或阴性结果：阳性染色细胞数≥5%者为阳性（+）,凡无阳性染色细胞或阳性染色细胞＜5%者为阴性（-）。

　　1.2.3 统计学处理

　　采用χ2检验，以p<0.05为差异有显著性。

　　2 结果

　　2.1 cox2和survivin表达与nsclc临床病理特征的关系

　　cox2和survivin阳性表达产物呈棕黄色或棕褐色颗粒状，定位于nsclc细胞质内。远离癌组织的正常支气管黏膜和肺组织cox2和survivin表达均阴性。65例nsclc中 cox2和survivin阳性表达分别为45例(70.8%)和43例(66.2%)。cox2和survivin表达率与nsclc病人的发病年龄和病理类型无关（p>0.05)，而均与nsclc的ptnm分期、病理分级、淋巴结转移和病人5年生存期有关（χ2=4.32-9.35，p<0.05）。见表1。齐鲁医学杂志2010年2月第25卷第1期 med j qilu, february 2010, vol.25, no.1　表1 cox2和survivin表达与nsclc临床病理特征的关系（略）

　　2.2 nsclc中cox2和survivin表达的关系

　　在cox2阳性表达的45例nsclc中, survivin表达阳性率为77.8%（35/45)，在cox2阴性表达的20例nsclc中, survivin表达阳性率为40.0%（8/20), nsclc中cox2表达与survivin表达呈显著正相关（r=0.41,p<0.05)。

　　3 讨论

　　近年来肿瘤分子生物学研究表明，恶性肿瘤形成和转移的发生是一个多基因、多因子各自发挥或相互协同作用的结果。因此，寻找、研究和揭示肿瘤的相关抗原或标志物与肿瘤的　关系，对肿瘤诊断、有效防治、预测预后及术后辅助治疗提供依据具有十分重要意义。环氧化酶(cox)是一种膜结合蛋白,具有双重酶的功能,是前列腺素类(pgs)生物合成的限速酶。它有两种同工酶，即结构型cox1和诱生型cox2。在正常生理状态下，绝大多数正常组织中检测不到cox2表达，它是一种诱导性即刻反应基因，只有当细胞受到刺激才能迅速诱导表达cox2。近年来研究表明，cox2除在炎症反应中起重要作用外，尚在肿瘤发生、发展、分化、转移和预后等方面可能有重要作用，它可通过刺激肿瘤细胞增殖和生长、抑制细胞凋亡、促进肿瘤血管形成、增加细胞侵袭力、抑制机体免疫功能、促进癌前病变向肿瘤转化等促进肿瘤的形成，因此许多肿瘤组织中cox2呈高表达[14]。

　　survivin基因是1997年由耶鲁大学的altieri等利用效应细胞蛋白酶受体1(epr1)cdna在人类基因库中杂交筛选并克隆出的一种凋亡抑制基因，属于iap家族新成员,其具有显著的抗凋亡作用。survivin基因具有肿瘤特异性表达的特点，其表达与细胞周期密切相关，是g2/m期的调节基因，参与细胞周期调控、有丝分裂及肿瘤的恶性转化，并与肿瘤的发生发展和预后密切相关[58]。本研究结果显示，cox2和survivin在远离癌组织的正常支气管黏膜和肺组织中均为阴性，而在nsclc组织中的阳性表达率分别为70.8%和66.2%，并随着ptnm分期及病理分级的增高、淋巴结转移的出现和病人的死亡，其阳性表达率均显著增高（p<0.05）。表明cox2和survivin主要存在于正在增殖或具有增殖能力的细胞中，与nsclc的发生发展、细胞的增殖与恶性转化、癌细胞的恶性程度以及病人的预后密切相关。本文结果提示，cox2和survivin表达越强烈的肿瘤细胞越具有较强的转移能力，预示nsclc病人临床预后不良。我们认为，检测nsclc中cox2和survivin蛋白表达，不仅对研究nsclc的发生发展是一个较可靠的重要标志物，而且对辅助判断肿瘤恶性程度、生物学行为及病人预后，也是一个具有较大价值的参考指标。

　　肿瘤形成和转移的发生是多基因、多因子共同作用的结果。本研究显示，在nsclc中cox2与survivin表达阳性率呈明显相关性, 提示这两种基因在肿瘤的增殖、进展和转移过程中可能存在着共同的激活机制，从而在nsclc的发生、发展中共同起作用，其机制有待进一步探讨。

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