作者：惠春，林大专，孙莹，张凌嬴，曾宪东
【摘要】 目的通过对茄子的根茎部位进行化学研究，为茄废弃部分的开发利用变废为宝奠定基础。方法采用大孔树脂、制备薄层等方法分离纯化茄子根茎部位中的芦丁，经理化常数、光谱学方法鉴定其结构，采用hplc法测定芦丁的含量，并通过大鼠高脂模型的药理实验验证茄茎提取物的降血脂效果。结果从茄子根茎部位中分离纯化得到的芦丁含量为97.2%，大、小剂量茄茎提取物可显著降低甘油三酯、总胆固醇水平。结论从茄茎和茄根中提取分离得到了具有降血脂作用的芦丁，提示茄根茎具有再利用的研究价值。
【关键词】 茄根茎; 芦丁; 再利用
abstract：objectiveto study the chemical constituents in the roots and stems of eggplant ,so as to provide the foundation for the eggplant abandoned part ssolvent extraction and column chromatography were used to isolate the rutin in the eggplant roots and stems，and physico-chemical constants and spectroscopic analysis were employed for structural elucidation，we determined the content of rutin by hplc and verified the hypolipidemic effects of eggplant stems extract through high fat rat model. resultsthe content of rutin was 97.2%，large or small doses eggplant stems extract could reduce evidently the contents of triglyceride and total cholesterol. conclusionrutin can be exrtacted and isolated from eggplant roots and stems, which shows eggplant roots and stems has the value of re-use.
key words：eggplant roots and stems; rutin; re-use
茄子为茄科植物，营养价值极高，除了富含各种糖类、蛋白质、维生素和钙、磷、铁等矿物质外，其中芦丁是其他各种蔬菜所不及的[1]。芦丁(rutin)又名芸香苷，有增强人体细胞间粘着力的作用，可防止血小管出血，具有降低兔和人血胆固醇的功效[2]。茄子的果实被人们广为利用，其他部位则变成了废弃物，本 论文 对茄子的废弃部位进行了化学研究。由于秋后叶、蒂的量很少，所以目前我们仅对根和茎部位进行了研究，初步提取分离得到了芦丁，茄茎中芦丁含量约为0.014%，茄根中芦丁含量约为0.009%，此外还分别提取分离得到了生物碱、多糖、有机酸的粗提物，为茄子废弃部分的开发利用变废为宝奠定了基础。
1 器材
1.1 仪器agilent 1200高效液相色谱仪(美国agilent公司)，色谱柱为kromasil5-c18柱(250 mm×4.6 mm，江苏汉邦科技有限公司);tu-1800紫外可见分光光度计(北京普析通用仪器有限责任公司);ab-8大孔树脂(d-101 天津市光复精细化工研究所); gf254硅胶预制薄层板(青岛海洋化工集团公司生产);甲醇为色谱纯，其他试剂为分析纯，实验用水为二次蒸馏水。
1.2 材料芦丁( 中国 医药集团上海化学试剂公司，f20030709);茄根、茎(10月份采集于长春郊区)。
1.3 动物和试剂雄性断乳wistar大鼠，体重50～60 g，购于吉林大学基础医学院动物部。高脂饲料(每千克基础饲料中加猪油80 g, 鸡蛋10个，胆固醇6g)。胆固醇，天津市光复精细化工研究所，批号为20051125。受试药物，黑色颗粒，纯度35%。
2 方法与结果
2.1 色谱条件以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，以甲醇-1%冰醋酸(32∶68)为流动相，检测波长为257 nm，流速为1.0 ml/min，柱温为30℃，进样量为20 μl[3，4]。
2.2 提取与分离茄根粗粉1 000 g加水，在搅拌下加入石灰乳，调至ph8～9，加热煎煮两次，时间分别是1.5 h和1 h，趁热过滤，得滤液。滤液在60～70℃下用浓hcl调至ph 4～5，静止过夜，离心，得褐色沉淀a1(28 g)。褐色沉淀溶于水，通过大孔树脂色谱柱，分别用水、30%，50%，75%，95%乙醇梯度洗脱，合并75%洗脱液，减压浓缩，干燥得黄色粗品1.1 g，将此粗品溶于水中，先用乙醚萃取，再用醋酸乙酯萃取，蒸干醋酸乙酯萃取液，用制备薄层纯化[展开剂为：醋酸乙酯-甲醇-甲酸-水(13∶5∶5∶3)]，得黄色粉末b1 85 mg。茄茎用同样方法处理得褐色沉淀a2(36 g)、黄色粉末b2144 mg。
2.3 芦丁的鉴定
2.3.1 物理性质所得黄色粉末测得mp.为174～178℃，易溶于热水、稀碱液和甲(乙)醇，在酸水溶液中析出黄色沉淀，难溶于三氯甲烷、石油醚等极性小的有机溶剂，微溶于丙酮和醋酸乙酯等有机溶剂。
2.3.2 化学检识取样品1 mg置于试管中，加乙醇2ml溶解，在水浴上小心加热溶解，滴加浓盐酸2～3滴，再加少许镁粉，溶液由黄色变为樱红色，说明该样品为黄酮类化合物。
取样品少许，加水溶解后，加入α-萘酚混匀后，沿试管壁滴加浓硫酸，界面出现棕色环，说明样品中含有糖或苷(芦丁)。纸上显色反应：日光下呈黄色斑点，紫外灯下为棕色，示为无游离3-oh的黄酮类化合物。
fecl3反应呈深褐色，说明含有酚羟基;中性醋酸铅反应产生肉红色沉淀，alcl3反应呈鲜黄色，示有邻二酚羟基。
取样品溶液1 ml，然后滴加2%zrocl2 的甲醇溶液，溶液颜色呈鲜黄色，说明可能有c3-oh或c5-oh，再继续向试管中加入2%柠檬酸的甲醇溶液，样品溶液黄色褪去，示无c3-oh，但有c5-oh。进一步证明该样品为含有5-oh。
2.3.3 芦丁的纸色谱检识分别取样品b1和b2少许，乙醇溶解，按照下列条件进行纸色谱鉴定，并与标准品对照，记载rf值进行比较。展开剂：正丁醇-醋酸-水(4∶1∶5)上层。显色剂：氨气熏。结果表明，样品和芦丁标准品均呈棕色斑点，而且rf值一致，说明为同一成分。
2.3.4 光谱鉴定uv(meoh)nm:257,265sh,298sh,359。
2.4 含量测定
2.4.1 对照品溶液的制备精密称取在120℃减压至恒重的芦丁对照品1.230 0 mg，加甲醇溶解稀释至10 ml溶液[5]。
2.4.2 供试品溶液的制备a1和a2样品溶液的制备：分别精密称定a1和a2细粉各约0.5g，精密加甲醇25 ml，称定重量，超声处理(功率100 w，40 khz)40 min，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，滤过，取续滤液经0.45μm滤膜(上海兴亚净化材料厂)过滤后备用。
b1和b2样品溶液的制备：合并b1和b2，精密称定细粉约1 mg，加甲醇溶解稀释至10 ml溶液。
2.4.3 线性关系考察精密称取芦丁对照品11.42 mg于25 ml容量瓶中，加甲醇溶解稀释至刻度，摇匀。取此溶液适量加甲醇配成5，10，25，50，100，150，300 μg·ml-1溶液，进样量20 μl，按“2.1”项色谱条件，以峰面积s对浓度c进行线性回归，得工作方程y=22.729x-0.004(r=0.999 5)，在5～300 μg·ml-1范围内，峰面积与芦丁浓度呈良好线性关系[6]。
2.4.4 最低检测限按信噪比>2 计算 ，本方法对芦丁的最低检测浓度为0.5 μg·ml-1[6]。
2.4.5 精密度分别取同一份对照样品，按“2.1”项下色谱条件，进行5次独立测定，其保留时间和峰面积的相对标准偏差分别为0.11%和0.86%。
2.4.6 回收率测定精密量取芦丁对照品溶液(0.12 mg/ml)1，2，3，4，5 ml，分别加入到5 ml已知含量(0.1167 mg/ml)的样品溶液中，按“2.1”项下色谱条件测定。结果见表1。表1 回收率测定结果
2.4.7 样品测定样品处理按“2.4.2”项下方法，色谱条件如前述，以外标法分别测定了茄茎和根粗提物及纯化产物中芦丁的含量。结果见表2。表2 样品测定结果
2.5 药理实验
2.5.1 大鼠高脂模型的建立取55只wistar大鼠，对照组10只，供给普通饲料，其余供给高营养饲料，自由进食，6周后选出模型成立的30只大鼠。
2.5.2 实验分组及指标检测将模型大鼠随机分3组，每组10只，模型组ig生理盐水10 ml/kg，大剂量组ig受试药物500 mg/kg，小剂量组ig受试药物300mg/kg，连续喂养2周，实验结束后，大鼠禁食24 h，麻醉后腹主动脉取血，离心分离血清，检测高密度脂蛋白、甘油三酯、总胆固醇。
2.5.3 实验结果见表3。结果表明，本实验模型成立，模型组与正常对照组比较有显著差异。茄茎提取物大、小剂量可显著降低甘油三酯、总胆固醇水平，与模型组比较p<0.01。表3 药理实验结果
2.5.4 结论芦丁在体内可转化为烟酰胺，通过抑制低密度脂蛋白的合成而影响胆固醇的合成，大剂量还可降低血清胆固醇及甘油三酯。本实验研究初步证明茄茎提取物具有降低甘油三酯和胆固醇作用，其在临床的降脂作用还有待进一步研究证明。
3 讨论
国内外尚未见茄根、茎、叶、蒂有效成分的系统研究及相应营养产品或药品转化的报道及专利。茄子是深受人们喜爱的蔬菜之一，其营养及药用价值很高，而其根、茎、叶、蒂来源较广、量大，目前在 农村 多做柴火使用，其营养及药用价值尚未得到充分利用，若能从中提取分离得到营养及药用价值较高的有效成分，并转化为相应的产品，可使茄子除果实之外的其他部分得到有效利用，创造一定的 经济 及社会效益[2]，同时还可为农产品的全面开发利用提供广阔的前景，使农民从中得到一定的经济收入。本研究仅初步从茄茎和茄根中提取分离得到了具有降血脂作用的芦丁，由于实验经费的限制，结构鉴定和其他有效成分的提取分离及单体的制备还有待于更深入的研究工作，尤其是提取物产率的提高和相应产品的转化更需要经济保障，我们会在后续的研究中进一步探索。
【 参考 文献 】
[1] 韩玉珠，粟长兰.17个茄子品种(系)芦丁含量及杂种优势研究[j].吉林农业大学学报，2002，24(6):39.
[2] 江苏新医学院.中药大辞典，上册[m].上海：上海科技出版社 1975：5.
[3] 陈金兰，张金恒，肖金霞，等.芦丁定量分析方法综述[j].时珍国医国药，2004，15(1):51.
[4] 国家药典委员会.
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