摘 要:目的:分析应用不同检测方法检测手足口病的临床效果。方法:选取手足口病确诊儿童132例,分离两份血清,一份测定cTnI含量,一份进行RT-PCR荧光分析,另对患儿进行CSF、WBC、hs-CRP及血糖联合进行检查,分析其各自效果。结果:cTnI检测阳性率为81.82%,荧光RT-PCR阳性率为97.73%,CSF、WBC、hs-CRP及血糖联合检查灵敏度为100%(P<0.05)。结论:荧光RT-PCR检测率高,CSF、WBC、hs-CRP及血糖联合检查的灵敏度高,两者均可作为确诊手足口病的临床依据。
关键词:手足口病;cTnI;荧光RT-PCR;联合检测
手足口病是一种发生于3岁以下儿童的常见传染病。其主要致病原因为肠道病毒,危害极大,传染性强,严重者可以危害患儿生命健康。其并发症可以造成中枢神经系统疾病,造成患儿残疾或死亡,临床上手足口病的主要检查方法是血清cTnI含量测定、血清荧光RT-PCR及实验室各种检查联合确诊。研究主要探讨这三种措施对手足口病确诊的效果,现报告如下。<?xml:namespace prefix = o ns = "urn:schemas-microsoft-com:office:office" />
1 资料与方法
1.1 一般资料:选取2011年5月~2012年4月我院住院就诊手足口病确诊儿童132例,所有患儿符合相关诊断标准。男63例,女69例;年龄7个月~5岁,平均(2.3±0.5)岁;<3岁92例,≥3岁40例;体重7.2~22 kg,平均(15.3±2.3)kg;所有患儿入院后均经常规体温和体格检查,抽验血常规,X线胸片检查。
1.2 检测方法:小儿静脉采全血3~5 ml,放置于真空无菌采血管中。分离血清后,置—20℃冰箱冷存,一份血清用于含量测定,采用散射比混浊发分析,以cTnI>0.30 ng/ml为阳性,另一份行荧光RT-PCR分析,实时荧光定量PCR反应在DA7600 PCR仪上行PCR扩增,按说明书进行反应混合液配制和循环参数设置,置阳性梯度模板与阴性对照,结果根据说明书进行[1]。
1.3 统计学处理:对文中所得数据进行统计学处理,采用SPSS 15.0软件进行分析,计量资料采用t检验,计数资料采用χ2检验,以P<0.05为差异有统计学意义。
2 结果
不同方法检测手足口病的检测阳性率:见表1。可以得出荧光RT-PCR分析的阳性检测率高于cTnI的阳性检测率(P<0.05);但是进行脑脊液白细胞、外周血白细胞、血糖及超敏C-反应蛋白的检测率却不高,为了进一步求证其联合检查,将灵敏度(Se)、特异度(Sp)、准确度(Ac)、阳性预测值(+PV)、阴性预测值(-PV)作为评价标准,结果见表2。
表1 不同方法进行检测手足口病的结果
项目
cTnI
荧光RT-PCR
脑脊液白细胞
WBC
血糖
hs-CRP
阳性(例)
108
129
72
78
83
92
阴性(例)
24
4
60
54
49
40
阳性率(%)
81.82
97.73
54.55
59.09
62.88
69.70
表2 CSF、WBC、hs-CRP及血糖检测诊断手足口病的评价(%)
组合
联合检测
Se
Sp
Ac
+PV
-PV
CSF检查
87.88
96.97
93.94
94.70
90.15
WBC
63.34
93.18
83.33
87.88
75.76
hs-CRP
98.48
66.67
83.33
71.21
91.67
血糖
95.45
68.94
77.27
79.55
89.39
WBC-hs-CRP-血糖-CSF平行联合检查
100.00
45.32
81.23
67.20
97.10
WBC-hs-CRP-血糖-CSF系列联合检查
60.61
100.00
82.13
100.00
71.32
3 讨论
cTnI是一种存在于心肌细胞中的特殊蛋白质,心肌细胞受损后,cTnI进入血液,在心肌受损后4~6 h后,血液中cTnI浓度达到最大,并长时间高浓度存在与血液中,最长可达2周左右,因此,对于心肌受损的手足口病,cTnI的含量检测具有比较高的临床价值[2]。荧光PCR技术是近几年新兴起的一项检测项目,其封闭性良好,减少实验中样品污染的几率,在特异性、敏感性与速度上相比于常规RT-PCR技术均具有一定的优势,本次研究表明,荧光RT-PCR技术的阳性检测率为97.73%,相比于cTnI的检测率81.82%,两者之间差异有统计学意义(P<0.05)。单项检查中,脑脊液及白细胞检查灵敏度仅为87.88%、63.34%,临床上意义不大。在特异度上,超敏C-反应蛋白及血糖检测率太低。将四项联合起来,进行平行检测和系列检测,平行检测是灵敏度提高到100%,系列检测特异性及阳性值提高到100%,可以得出,联合检测有助于提高诊疗度。
综上所述,采用荧光RT-PCR技术或CSF、WBC、hs-CRP及血糖联合检查,是诊断手足口病的合理方法。临床值得应用。
4 参考文献
[1] 赵鲜丽.40例手足口病患儿的护理[J].中国实用医药,2008,35(3):158.
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